新城疫病毒JZO5株F基因重組pGAPZα的構建

摘要：以RT—PCR擴增新城疫病毒JZ05株F基因F1片段和F2片段，以核酸內切酶Kpn I 和Xba I 對目的基因片段及質粒pGAPZαA進行酶切，連接酶切產物，轉化Eacterium coli DH5α。以PCR方法確定JZO5 F1的陽性重組子為2個，JZO5 F2的陽性重組子為4個。對陽性重組子進行酶切鑒定及序列分析，結果發現，重組質粒pCAPZαA—F1、pGAPZαA—F2及質粒pCAPZαA的酶切電泳條帶與試驗設計大小相符；基因測序得到的重組子中F1和F2序列長度分別為1198bp、269bp，與新城疫病毒JZO5株，基因序列比對。其序列長度和核苷酸排列完全一致。這表明重組質粒中目的基因片段的核苷酸序列、大小和插入位置是正確的，為以酵母表達系統表達Fl和F2、研究強毒株與弱毒株F蛋白的抗原性差異程度及研制重組亞單位疫苗打下了基礎。

關鍵詞：新城疫病毒：F基因；質粒pGAPZαA；重組

中圖分類號：S852.65⁺9:Q78

文獻標識碼：A

文章編號：0439—8114(2009)11—2639—03