大腸桿菌不耐熱腸毒素B亞單位基因的原核表達
2009-12-31 00:00:00梁望旺周丹娜劉澤伍銳楊克禮段正贏鄧均華徐滌平
湖北農業科學 2009年11期
摘要：大腸桿菌(Escherichia coli)不耐熱腸毒素B亞單位(LTB)不僅是重要的黏膜免疫原，而且作為佐劑在黏膜免疫中起著重要的作用。試驗采用PCR方法擴增了腸毒素性大腸桿菌的LTB基因．并將其克隆到pGEX—KG原核表達載體上，構建了重組質粒pKG—LTB，經酶切和測序鑒定后，轉化到大腸桿菌BL21(DE3)進行IPTG誘導表達，經SDS—PAGE和westem—h1ot分析表明，克隆的LTB基因與谷胱甘肽轉移酶(GST)基因獲得了高效融合表達，表達的融合蛋白GST—LTB分子量約為35kDa，并具有免疫反應活性。這為進一步研究LTB蛋白黏膜免疫原性和黏膜佐劑的作用奠定了基礎。
關鍵詞：腸毒素大腸桿菌；不耐熱腸毒素：克隆；原核表達
中圖分類號：S852.61+2；Q78
文獻標識碼：A
文章編號：0439—8114(2009)11—2627—03
