菜豆苗期抗炭疽病接種方法比較

李 梅 郭建華 劉學(xué)東 呂彥超 王文艷

摘要:對(duì)不同接種方式及接種時(shí)期下,菜豆對(duì)炭疽病菌孢子的抗性情況進(jìn)行了比較研究,結(jié)果發(fā)現(xiàn),在菜豆播種后6～8 d,選用噴霧方式接種是抗炭疽病材料篩選的適宜方法。

關(guān)鍵詞:菜豆;炭疽病;接種

中圖分類號(hào):S643.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼: A 文章編號(hào):1006-6500(2009)01-0031-02

Comparison of Inoculation Method for Anthracnose Resistance in Bean Seedling

LI Mei,GUO Jian-hua,LIU Xue-dong,LV Yan-chao,WANG Wen-yan

(Dalian Institute of Agricultural Sciences,Dalian 116036,China)

Abstract:The anthracnose resistance of bean was compared by different inoculation method and inoculation stage. The results found that the proper method for selecting the anthracnose resistant bean lines was spray inoculation after sowing 6～8 d.

Key words: bean;anthracnose;inoculation

菜豆炭疽病(Colletotrichum lindemuthianum)是造成菜豆生產(chǎn)嚴(yán)重?fù)p失的主要病害之一,尤其是對(duì)食莢菜豆,嚴(yán)重影響其品質(zhì)和產(chǎn)量。選育、種植抗病或耐病品種是防治該病的最安全和經(jīng)濟(jì)有效的一種方法。而菜豆抗炭疽病鑒定方法的確立是抗病育種工作之首。菜豆抗炭疽病鑒定方法在國外已有涂抹、注射、胚軸接種等報(bào)道,結(jié)合我們抗病育種現(xiàn)狀,筆者對(duì)接種菜豆苗齡及接種方式進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn)。

1 材料和方法

1.1 材 料

供試菌種:單孢分離的大連菌株(α菌株)。

供試菜豆:無筋一號(hào)。

栽培基質(zhì):蛭石,裝入口徑為8 cm的塑料營養(yǎng)缽內(nèi)。

1.2 方 法

胚根接種:浸種催芽,將發(fā)出根芽的菜豆種子浸蘸2.4×106個(gè)/mL濃度的炭疽病菌孢子懸浮液,10 min后播種于含有飽和水分的裝有蛭石的缽內(nèi),每缽5粒籽。出苗后調(diào)查病情指數(shù)。

胚芽接種:用滴管將濃度為2.4×106個(gè)/mL的炭疽病菌孢子懸浮液滴入剛出土的菜豆子葉縫里(子葉接種),待兩片真葉發(fā)出展平后,調(diào)查病情指數(shù)。

噴霧接種:將濃度為2.4×106個(gè)/mL的炭疽病菌孢子懸浮液噴霧接種于菜豆幼苗(兩葉一心)上,7 d后調(diào)查病情指數(shù)。

涂抹接種:將濃度為2.4×106個(gè)/mL的炭疽病菌孢子懸浮液,用脫脂棉輕輕涂抹于已展平的菜豆兩片真葉的正反面,7 d后調(diào)查病情指數(shù)。

1.3 接種菜豆的苗齡研究

分別在播種后10 d的菜豆幼苗(即兩片真葉已展平,心葉已長(zhǎng)出伸展)、8 d的菜豆幼苗(即兩片真葉剛展平,心葉露出)、6 d的菜豆幼苗(兩片真葉尚未展平,小心葉剛露出尖)、3 d的菜豆幼苗(即子葉剛裂開露出真葉尖)上,用2.4×106個(gè)/mL濃度的炭疽病菌孢子懸浮液噴霧接種。接種菜豆各播種30粒,分3次重復(fù),每重復(fù)2盆,每盆5粒種子。接種溫度17 ℃左右,使用LJ-15B離心加濕器,保持濕度為100%,遮光48 h后緩緩升溫至24～25 ℃,每天噴水一次,保持濕度不低于80%。7 d后調(diào)查感病情況。

2試驗(yàn)結(jié)果

2.1 接種方法對(duì)比

不同接種方法的調(diào)查結(jié)果如表1所示,胚芽接種僅在莖上有病斑,而葉片不產(chǎn)生病斑,且病情指數(shù)最大,蘸根接種的最小。

2.2 接種菜豆的苗齡與致病力研究

不同苗齡的菜豆噴霧接種后的致病結(jié)果如表2示。播后6～8 d接種的病情指數(shù)最大。

3 問題與討論

(1)綜合國內(nèi)外報(bào)道資料,菜豆炭疽病的接種方法主要有如下幾種:其一是用孢子懸浮液噴接菜豆兩片真葉和一個(gè)小心葉幼苗(Ferrante等,1976;李佩琳等,1992);其二用注射器將孢子懸浮液注射入已展開的單片葉片(Theocrou M K等,1979);其三胚軸接種(Dixon G O等,1973);其四將孢子懸浮液涂抹在葉片的兩面(Tu J C等,1979)。接種的菌液濃度為1×105～107個(gè)孢子/mL。

參考上述報(bào)道,我們對(duì)孢子懸浮液涂抹葉片、噴霧葉片及滴入子葉芽縫隙內(nèi)、浸蘸萌發(fā)的胚根等方法進(jìn)行試驗(yàn)比較,除蘸根(浸蘸萌發(fā)的胚根)接種以外的3種接種方式均可表現(xiàn)感病。根據(jù)我們的條件認(rèn)為,孢子懸浮液涂、噴菜豆兩片真葉和一個(gè)小心葉的幼苗接種方法為佳。尤其是做抗病育種的品種資源篩選,需要篩選的材料很多,批量大,而且還需對(duì)接種后表現(xiàn)抗病或者不顯病癥的幼苗移栽種植,因此,噴霧接種的方法最簡(jiǎn)便易行。

(2)關(guān)于接種菜豆幼苗的苗齡(兩葉一心),一般在播種后6～8 d即可。因?yàn)樵谧隹共∑贩N資源篩選時(shí),需要同時(shí)(一批)做幾十個(gè)不同品種(品系)的種子。種子發(fā)芽,出苗早晚有差異。在播種后6～8 d內(nèi)的菜豆苗,有的已達(dá)到兩葉一心,有的剛露出心葉尖,有的甚至子葉剛裂開,露出真葉尚未展開,用孢子懸浮液同時(shí)噴霧接種均可以達(dá)到感病的效果。

(3)我們應(yīng)用上述方法在17 ℃左右室溫下,用21～23 ℃培養(yǎng)15 d的菌種濃度2.4×106個(gè)孢子/mL噴霧接種于播種后7 d的菜豆幼苗,濕度100%,遮光48 h,緩緩升溫至25～26 ℃并保持,每天噴水保濕80%以上。此外,在接種前3～4 h不給光照并給與降溫,有利于浸染。7 d后調(diào)查記錄感病程度。應(yīng)用上述方法對(duì)190多份資源進(jìn)行篩選鑒定,并對(duì)雜交F2～F5進(jìn)行多次抗病鑒定,對(duì)較抗病、耐病菜豆株進(jìn)行繁育,以期選育出抗菜豆炭疽病的品種。

參考文獻(xiàn):

[1] 菜豆種質(zhì)資源主要性狀鑒定子專題組.莢用菜豆品種資源炭疽病苗期抗病性鑒定[J].中國蔬菜,1992(6):21-23.

[2] 王曉鳴,李怡琳,李淑英.菜豆種質(zhì)資源對(duì)菜豆炭疽病抗性鑒定研究[J].作物品種資源,1989(2):18-19.

[3] 吳全安.糧食作物種質(zhì)資源病蟲鑒定方法[M].北京:農(nóng)業(yè)出版社,1991:60-61.