海楓藤花粉塊的離體萌發(fā)試驗(yàn)研究

郭 慶 翟書華 王德斌 岑曉江

摘要通過對(duì)海楓藤花粉塊的離體萌發(fā)試驗(yàn)研究結(jié)果表明:不同蔗糖濃度、不同激素、不同花期海楓藤花粉塊的萌發(fā)率不同,以蔗糖濃度為10%,含15mg/L 6-BA,初花期的花粉塊萌發(fā)率最高。

關(guān)鍵詞海楓藤;花粉;離體萌發(fā)

中圖分類號(hào)S567.1文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào) 1007-5739(2009)11-0030-02

海楓藤(Marsdenia officinalis Tsiang et P.T.Li)屬蘿摩科植物,主要分布在我國(guó)浙江、湖北、四川等省區(qū),全株可藥用,有舒經(jīng)通絡(luò)、散寒、除濕、止痛等功效,為云南彝族地區(qū)常用草藥。目前國(guó)內(nèi)還沒有對(duì)海楓藤花粉塊萌發(fā)研究的報(bào)道,本試驗(yàn)旨在探討海楓藤花粉塊萌發(fā)所需的培養(yǎng)基成分和海楓藤活力測(cè)定應(yīng)選擇的花粉塊。

1材料與方法

1.1材料的采集與處理

供試材料采集自云南省昆明市石林縣奎山鎮(zhèn)雙龍鄉(xiāng)山地林中,將采集到的花枝進(jìn)行扦插備用。

1.2花粉塊離體萌發(fā)的方法

1.2.1不同蔗糖濃度對(duì)花粉塊萌發(fā)的影響。采用蔗糖液體培養(yǎng)基,以蒸餾水作為空白對(duì)照。將在剛開的花中解剖得到的20個(gè)花粉塊置于含蔗糖液的載玻片上,蔗糖處理濃度分別為0%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%、11%、12%、13%。將載玻片放入盛有濕濾紙的培養(yǎng)皿中再蓋一個(gè)較大的培養(yǎng)皿,置于30℃恒溫箱中培養(yǎng),自接種后每3h用顯微鏡檢測(cè)1次,共8次。觀察中以萌發(fā)花粉管為具有生活力的標(biāo)志,統(tǒng)計(jì)萌發(fā)花粉管的數(shù)量,計(jì)算出萌發(fā)率。花粉萌發(fā)率(%)=(已萌發(fā)的花粉數(shù)目/花粉粒總數(shù))×100%。

1.2.2不同植物激素對(duì)花粉塊萌發(fā)的影響。采用液體培養(yǎng)基,以蒸餾水為空白對(duì)照。將上述材料中在剛開花中解剖得到的20個(gè)花粉塊置于含培養(yǎng)基的載玻片上(培養(yǎng)基成分見表2),將載玻片放入盛有濕濾紙的培養(yǎng)皿中再蓋一較大的培養(yǎng)皿,置于30℃恒溫箱中培養(yǎng),自接種后18h用顯微鏡檢測(cè),統(tǒng)計(jì)萌發(fā)花粉管數(shù)量,計(jì)算出萌發(fā)率。花粉萌發(fā)率(%)=(已萌發(fā)的花粉數(shù)目/花粉粒總數(shù))×100%。

1.2.3不同花期花粉塊的萌發(fā)試驗(yàn)。采用上述2個(gè)試驗(yàn)中篩選出的對(duì)花粉塊萌發(fā)最好的培養(yǎng)基,以蒸餾水為空白對(duì)照。在生長(zhǎng)正常的植株上摘下未開的花、微開的花、剛開的花、開后1d的花、開后2d的花、開后3d的花若干,從花藥囊中解剖出20塊花粉塊置于含培養(yǎng)基的載玻片上,將載玻片放入盛有濕濾紙的培養(yǎng)皿中,再蓋一較大的培養(yǎng)皿,置于30℃恒溫箱中培養(yǎng),自接種后每3h用顯微鏡檢測(cè)1次,共8次,測(cè)量長(zhǎng)出的每1個(gè)花粉管的長(zhǎng)度,統(tǒng)計(jì)每種萌發(fā)花粉管的數(shù)量,計(jì)算出萌發(fā)率。花粉萌發(fā)率(%)=(已萌發(fā)的花粉數(shù)目/花粉粒總數(shù))×100%。

2結(jié)果與分析

2.1不同蔗糖濃度對(duì)花粉塊萌發(fā)的影響

海楓藤具有腋生的聚傘形花序,花被由5個(gè)花萼和5個(gè)花瓣組成,雌蕊由2個(gè)心皮組成,5個(gè)雄蕊的花絲聯(lián)合形成1個(gè)柱狀結(jié)構(gòu),由肉質(zhì)的柱頭和雄蕊在花中聯(lián)合形成合蕊柱結(jié)構(gòu)。每個(gè)花粉囊里載有1對(duì)花粉塊,花粉塊腎形,成對(duì)的花粉塊由2個(gè)轉(zhuǎn)運(yùn)柄連接到1個(gè)棕色的著粉腺上(見圖1)。每個(gè)花粉塊中約含有花粉100粒左右,花粉除有花粉壁外還有由蠟質(zhì)的花粉塊壁包裹。花粉塊中花粉的萌發(fā)見圖2。

從表1可看出,海楓藤花粉塊在蔗糖濃度為10%且培養(yǎng)時(shí)間為15~24h時(shí)萌發(fā)率最高,為20.38%,低于10%比高于10%更有利于花粉的萌發(fā),在不含蔗糖的對(duì)照中花粉萌發(fā)率為0。蔗糖是花粉萌發(fā)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和能量來源,不同的蔗糖溶液對(duì)花粉萌發(fā)的影響也就不相同。

2.2不同植物激素對(duì)花粉塊萌發(fā)的影響

從表2可看出,海楓藤花粉塊在蔗糖10%+硼酸0.1%+氯化鈣5mg/L+6-BA 15mg/L的培養(yǎng)基中萌發(fā)率最高,為43.30%。在適宜的糖、硼酸和氯化鈣濃度條件下,除15mg/mL 6-BA外,其他激素對(duì)花粉萌發(fā)率沒有顯著作用。

2.3不同花期對(duì)花粉塊萌發(fā)的影響

從表3可看出,剛盛開的花即初花期花粉的萌發(fā)率最高,為47.30%,初花期前的花粉塊尚未完全發(fā)育成熟,故萌發(fā)率較低,初花期后的花粉塊由于營(yíng)養(yǎng)和其他環(huán)境因素的影響,萌發(fā)率有微小的降低,但降低的速度較緩慢。

3結(jié)論與討論

花粉的生活力受到遺傳因素和環(huán)境因素的影響,海楓藤的花粉可能由于有耐久的花粉和花粉塊壁的保護(hù),能較長(zhǎng)時(shí)間保持生活力,這應(yīng)該是提高傳粉效率的一種適應(yīng)。研究發(fā)現(xiàn),不同蔗糖濃度、不同激素、不同花期海楓藤花粉塊的萌發(fā)率不同,以蔗糖為10%,含15mg/L 6-BA,初花期的花粉塊萌發(fā)率最好。但是此法需要一定的溫度,為了使試驗(yàn)結(jié)果更準(zhǔn)確可信需要一定的重復(fù)試驗(yàn)。在所有海楓藤花粉塊的萌發(fā)過程中還表現(xiàn)出一個(gè)規(guī)律,即只有與轉(zhuǎn)運(yùn)柄相連接的相鄰部位才有頂破花粉塊壁伸出來的花粉管,中間的花粉粒依次從相同的方向伸出花粉管,而其余部位均沒有花粉管伸出(見圖2),而形成這一現(xiàn)象的原因還有待于進(jìn)一步研究。

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