硫酸-高氯酸-鉬銻抗比色法測定土壤全磷的注意事項

趙金蘭 張樹蓮 祁建峰

摘要 針對應用硫酸-高氯酸-鉬銻抗比色法測定土壤全磷過程中影響測定值的因素進行了闡述,包括樣重、消煮時間、定溶濃度、顯色時間與溫度等,并說明了測定過程中各環節應注意的事項,以供參考。

關鍵詞硫酸-高氯酸-鉬銻抗比色法;測定;土壤全磷;影響因素;注意事項

中圖分類號X833文獻標識碼B文章編號 1007-5739(2009)21-0234-01

從2007年起至今,門源縣農業技術推廣中心依托農業部實施的《測土配方施肥補貼》項目,采集全縣不同地區不同土質,并就氮、磷、鉀、有機質、酸堿度等指標進行了分析測定。土壤中含磷化合物絕大部分是難溶性的,能被水或弱酸溶解的數量很少,很難被作物吸收利用,因此門源地區農作物經常出現缺磷癥狀。通過對土壤含磷量的測定,可以了解土壤中磷的豐缺狀況,為合理施用磷肥提供科學依據。全磷的測定方法有硫酸—高氯酸—鉬銻抗比色法、硫酸—高氯酸—鉬抗比色法等多種,其中前者是最常用的一種,該方法具有操作簡單、對酸度要求不太嚴格的特點,適應于一般化驗室分析。

1影響硫酸—高氯酸—鉬銻抗比色法全磷測定值的因素

一是樣重。樣重過大,如0.220 1g,用吸光值計算P2O5在土壤中的含量時數值會偏小,使得平行樣出現不平行情況。樣重過小,則數值偏大。二是消煮時間。消煮時間一般要求45~60min。若消煮時間過短,小于45min,煮出的溶液顏色和溶液粘度均達不到要求,溶液顏色呈現為灰白色。溶液粘度小,還會影響調整酸度時的顏色變化,引起加入的氫氧化鈉溶液的量過多或過少,影響結果計算的準確性。消煮時間大于60min,會造成溶液焦糊。三是定容濃度。定容時超過容量瓶刻度線,造成溶液濃度過稀,定容顯色后溶液呈現的微藍色過淡,在分光光度計中讀出的吸光值與同等樣品相比,數值偏小。四是顯色時間。顯色時間達到30min,顯色完全。顯色時間達不到30min,會使顯色不完全,測出的吸光值偏小;顯色時間過長,待測液顏色過濃,測出的吸光值偏大,或使分光光度計不讀值。五是顯色溫度。顯色溫度低于10℃,待測液出現藍色沉淀,影響測定結果。

2硫酸—高氯酸—鉬銻抗比色法的注意事項

一是準確稱樣。稱取0.25mm孔徑的烘干土樣0.2g(精確到0.000 1g)于50mL凱氏瓶中,樣重不能少于0.200 0g,也不能多于0.220 0g。平行樣樣重要基本接近,稱樣器要始終保持干凈,否則測定結果不準確。二是把握好消煮程序的每個環節。加入3mL硫酸和10滴高氯酸消煮時,開始溫度不能太高,否則溶液濺出會造成損失,這個過程約需15min;當消化至高氯酸霧狀白煙消失后,再提高溫度,這個過程需要30~45min,整個消煮過程需要45~60min,消煮時間絕不能少于45min。消煮過程中每間隔15min要輕輕搖動凱氏瓶。凱氏瓶上必須放置彎頸小漏斗,以免溶液濺出。三是正確洗液與定容。待測溶液用蒸餾水洗入100mL容量瓶內過程中,沖洗應少量多次,洗液時凱氏瓶不能離開容量瓶瓶口,以防止原液灑出,影響測定結果的準確性。若原液灑出應用吸管將原液吸入容量瓶中。洗完后輕輕搖動容量瓶,將溶液完全冷卻后,用蒸餾水定容到容量瓶刻度線,靜止澄清(最好過夜)。定容液不能超過容量瓶刻度線。定容時蒸餾水不能太熱,蒸餾水溫度過高會影響定容體積。待測液濃度過稀或過濃,都會影響測定結果的準確性。四是精確分倍與調酸。吸取靜止澄清5mL待測液置于50mL容量瓶內,加水約20mL及2,4-二硝基酚指示劑1滴,待測液顯微黃色,再加提前配制好的40mL的氫氧化鈉溶液1~2吸管(5~10mL)調酸度,待測溶液變成無色溶液時為止,然后用蒸餾水定容到50mL容量瓶中,顯色30min。若分倍時吸取的原液量小于5mL時,待測液濃度過稀,影響測定結果。五是顯色液、指示劑隨用隨配。在配制顯色液時,抗壞血酸必需完全溶解于鉬銻抗貯備液中,配制時用玻璃棒輕輕攪動溶液,當顯色液顏色由淡黃色變為深黃色時,表示抗壞血酸完全溶解。顯色液見光容易分解,要隨用隨配。配制指示劑時,2,4-二硝基粉(保存在陰暗避光處)必須溶于95%的酒精中,若酒精濃度是99%,一定要稀釋為濃度為95%的酒精。六是控制好顯色時間和溫度。顯色時間必須達到30min后立即比色,而且比色溫度要控制在15℃以上,溫度越高越好。若溫度低于10℃,顯色后有藍色沉淀發生,影響比色結果。七是調整波長。開機調整波長,比色時波長一定要調到700nm,切記要與土壤速效磷測定比色波長660nm相區別。八是及時比色。參比液(蒸餾水中加3mL濃硫酸和10滴高氯酸后與樣品一同煮沸)和待測液倒入比色皿中,液面不能超過比色皿的刻度線。分光光度計要提前預熱30min。然后,在T%狀態下關蓋調滿度100,打開蓋調零,調穩后在ABS狀態下測吸光值(E)。九是結果計算采用四舍六入五留雙。如計算數值0.677 4應計為0.677,0.677 6應計為0.678,0.677 5應計為0.678,0.678 5應計為0.678。

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