５２例乙型肝炎患者血清５羥色胺變化分析

殷海燕　王合群　周雍軍　石貴福

【摘要】 目的 本研究檢測5-TH在慢性HBV感染者血清的水平，分析其與ALT、HBV-DNA的相關性。方法 收集2008年2月至10月就診于本院的慢性HBV感染者及健康志愿者共62例，檢測其5-TH的含量。結果 慢性乙型肝炎組為5-TH的水平高于正常對照組，結果有顯著性差異（P<0.05）。HBV DNA、5-TH和ALT三者之間相關性分析：5-TH與HBV DNA呈負相關；5-TH與ALT之間成正相關。結論5-TH也許可以作為一個新指標與ALT共同評價慢性HBV感染者。

【關鍵詞】 乙型肝炎;5羥色胺;免疫

本研究檢驗健康人及慢性HBV感染者血清中5-TH的水平，觀察其與ALT、HBV-DNA等臨床常用指標的相關性，以了解機體免疫功能，探索準確全面地評價慢性HBV感染者免疫功能的方案及在抗病毒治療中的應用前景。以期能對抗病毒治療前免疫功能的評價及抗病毒治療有所幫助。

1 資料與方法

1.1 研究對象 2008年2月~10月期間本院消化內科就診的患者52例，男35例，女17例，年齡22~68歲，平均年齡（45.3±17.6）歲，均為慢性乙型肝炎患者。健康志愿者10例，男7例，女3例，年齡20~59歲，平均（36.1±14.5）歲，對位對照組。診斷和臨床分型符合2005年中華醫學會肝病學及感染病學分會聯合制定的《慢性乙型肝炎防治指南》。納入標準：年齡18~80，性別不限；乙肝五項中HBsAg為陽性，其它項不限；HBV DNA為陽性；半年內未用過免疫調節劑。排除標準：合并除乙肝外其它各型肝炎病毒感染；存在肝炎病毒以外其它病毒、細菌、真菌感；有非感染性炎癥；患有自身免疫性疾病。

1.2 標本采集與方法 5-HT樣本的制備：于清晨醒后平臥30 min，取血5 m，l置于含5%EDTA-Na20. 1 ml的聚丙烯塑料管中，混勻，500 r/min離心10 min，取血漿2 ml10 000 r/min離心30 min，去除上清液，剩下沉淀，加入1 ml稀釋液，混勻，取20μl測量血小板值，剩余液體10 000 r/min離心20 min，去除稀釋液，加入0. 8 ml重蒸水，混勻，立即放-40℃冰箱保存。

5-HT含量測定：將樣本于-40℃和4℃反復凍融2次，取200μl液體，加入10μl高氯酸，混勻， 10 000 r/min離心20 min，取上清液150μ，l加入內標1 ng/μlDHBA30μ，l取100μl進樣。Water's雙泵，電化學檢測器檢測分析。其余血樣用于HBV DNA、ALT、乙肝五項等指標的檢測。

1.3 統計學處理 實驗數據用均數±標準差(x±sD)表示，P<0.05為差異有統計學意義。各指標間相關關系采用直線相關分析。所有數據均運用SPSS(11.5)統計軟件處理。

2 結果

2.1 5羥色胺兩組情況 對照組為（161.45±31.3）ng/ml，慢性乙型肝炎組為（219.15±55.57）ng/ml，水平高于正常對照組，兩組比較均有顯著性差異（P<0.05）。

2.2 慢性乙型肝炎組HBV DNA、5羥色胺和ALT三者之間相關性分析 5-TH與HBV-DNA呈負相關（r=-0.769，P<0.05），5-TH與ALT之間成正相關（r=0.724，P<0.05），ALT與HBV-DNA呈負相關（r=-0.705，P<0.05）。

3 討論

HBV感染已經成為一個全球性健康問題，對人類的健康和生命造成了嚴重危害。但并非所有被感染者的健康都會受到損害。受病毒和宿主免疫功能等因素影響，HBV感染后可出現不同的結局或臨床類型，宿主的免疫功能是決定HBV感染后病情發展和轉歸的重要因素。以5-TH為代表的細胞因子，可增強細胞免疫應答^［1］。為了解慢性HBV感染者的免疫功能，張英劍等檢測了105例慢性乙型肝炎患者5-TH的水平，結果與正常對照組相比水平均顯著升高，本實驗檢測了5-TH的水平結果顯示在慢性HBV感染者中5-TH水平較正常對照組高，該結果與與張英劍等的結論一致。當沒有致病性的細菌、病毒等有害微生物侵犯人體時，機體的免疫系統處于相對靜息狀態。T細胞、B細胞和吞噬細胞等免疫細胞及其分泌的細胞因子的數量都處于一個較低的水平。當有害微生物作用于人體免疫系統被激活后，上述免疫細胞分泌的細胞因子也隨之增多。對于HBV等病毒感染來說，5-TH型細胞因子增多使機體的免疫功能增強，才有利于病毒的清除而使機體恢復健康^［2］。

5-TH是執行非細胞溶解機制的主要細胞因子，同時具有免疫調節和直接抑制病毒復制的雙重作用：一方面，5-TH是Th1型細胞因子中的一員，有助于Th0向Th1分化，進而促進CTL的增殖、分化、成熟。因此可以促進細胞介導的免疫應答，有利于病毒的清除；另一方面，5-TH可以通過清除病毒的衣殼顆粒及其內含有的復制性病毒基因組、使病毒RNA失穩等途徑發揮直接抑制HBV復制的作用^［3］。為了探討5-TH在慢性乙型肝炎患者的水平及臨床意義，我們觀察了5-TH、HBV DNA和ALT之間的相關性。結果在慢性乙型肝炎組，5-TH和ALT都與HBV DNA呈負相關，5-TH與ALT之間呈正相關關系。根據以上結果推測在慢性乙型肝炎組，5-TH通過非細胞溶解機制抑制了HBV的復制，而溶細胞機制并未起明顯的作用^［4］。5-TH可能較ALT更適合于評價該組患者的免疫功能。慢性乙型肝炎組中兩種機制都發揮了作用，并且兩機制的抗病毒作用強度之間呈正相關關系。5-TH也許可以作為一個新指標與ALT共同評價慢性乙型肝炎患者的免疫狀態。但是否有臨床價值還有待進一步證實。

參考文獻

［1］ Mosmann TR,Cherwinski H,Bond MW,et al.Two ypes of murine helper T cell clone. I. Definition according to profiles of lymphokine activities and secreted pro teins.J Immunol, 1986, 136(7):2348-2357.

［2］ Nakamura T,Lee RK,Nam SY,et al.Roles of IL-4 and IFN-gamma in stabilizing the T helper cell type 1 and 2 phenotype.J Immunol,1997,158(6):2648-2653.

［3］ 姜榮龍,盧橋生,駱抗先,等.慢性乙型肝炎病毒感染者外周血T輔助細胞1、2型因子的水平.中華傳染病雜志,2000，18（1）：26-28.

［4］ Penna A,Del PG,Cavalli A,et al.Predominant T-helper 1 cytokine profile of hepatitis B virus nucleocapsid-specific T cells in acute self-limited hepatitis B.Hepatology,1997,25(4):1022-1027.