ＭＭＰ－９在骨肉瘤中的表達及意義

周錢宏　劉愛東

【摘要】 目的 檢測骨肉瘤中MMP-9的表達，探討其在骨肉瘤發生、發展及轉移中的作用。方法 應用免疫組織化學技術檢測46例骨肉瘤標本中MMP-9的表達。結果 MMP-9在骨肉瘤組織中的表達量明顯高于良性骨腫瘤組織，在有無軟組織浸潤及不同Ennecking分期的骨肉瘤之間比較，MMP-9表達差異有統計學意義(P<0.05)。結論 骨肉瘤組織中MMP-9高表達，MMP-9在骨肉瘤發展中起重要作用。

【關鍵詞】 腫瘤；骨肉瘤；MMP-9；免疫組織化學

基質金屬蛋白酶-9(Matrix metalloproteinase，MMP-9)是基質金屬蛋白酶家族中的重要成員，是92kDa的明膠酶B，主要由巨噬細胞、結締組織細胞和某些腫瘤細胞合成分泌。骨肉瘤是常見的腫瘤，其發病率呈上升趨勢，本試驗通過免疫組化方法檢測MMP-9在骨肉瘤及良性骨腫瘤中的表達情況，探討MMP-9與骨肉瘤臨床病理特征的關系。

1 資料與方法

1.1 材料 收集我院骨肉瘤手術治療后經病理確診的病例46例，年齡為11-45歲，其中男25例，女21例，術前均未進行任何治療，同時選取12例良性骨腫瘤作為對照(骨樣骨瘤6例，骨母細胞瘤6例)。

1.2 免疫組織化學方法檢測MMP-9的表達 采用S-P法，MMP-9單克隆抗體購自北京中彬金橋生物技術有限公司，試驗過程按照嚴格按照說明書進行，并設用PBS代替一抗作為陰性對照。

1.3 結果判定標準 每張切片均由病理主治醫師確診，并分別觀察具有代表性的10個高倍視野。MMP-9陽性染色者在細胞膜和(或)細胞漿有棕黃色顆粒沉著，根據細胞膜或胞漿的染色程度及染色細胞百分率進行分析評分，基本不著色者為0分，著色淡者為1分，著色適中者2分，著色深者為3分。著色細胞占計數細胞百分率≤5%為0分，6%-25%為1分，26%~50%為2分，≥51%為3分。將每張切片著色程度得分與著色細胞百分率得分各自相乘，為其最后得分。0-1分為陰性，2-3分為弱陽性，≥4分為強陽性。弱陽性與強陽性均計為陽性。

1.4 統計學方法 各組間比較用χ²檢驗或Fisher檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義，所有統計學數據均用統計學軟件分析完成。

2 結果

2.1 MMP-9在骨肉瘤、良性骨腫瘤中的表達 46例骨肉瘤標本中37例MMP-9陽性表達，陽性表達率為80.4%，12例正常骨組織中無陽性表達，兩者比較差異有統計學意義，見表1。

2.2 MMP-9的表達與骨肉瘤臨床病理特征的關系 骨肉瘤中，不同軟組織浸潤、不同Ennecking分期的MMP-9表達比較差異有統計學意義(P<0.05)，見表2。MMP-9在不同年齡、不同性別、不同腫瘤直徑的分組表達中差異無統計學意義(P>0.05)。

3 討論

MMP-9是基質金屬蛋白酶家族中的重要一員，又名明膠酶B，因能降解基底膜和細胞外基質的多種成分而倍愛關注。MMP-9位于染色體20q12-q13上，基因全長4506 bp，含有13個外顯子。主要作用底物為構成細胞外基質基底膜支架的IV型膠原酶，另外還能降解V、VII、X型膠原、明膠、纖維連接蛋白等，有研究認為在組織發育、傷口愈合及腫瘤侵襲時被誘導表達^[1]。楊猛^[2]等用免疫組織化學二步法研究MMP-9在直腸癌中的表達，認為其可作為直腸癌浸潤轉移重要的分子標記物，對判斷直腸癌的預后具有重要意義。徐曉輝^[3]等用免疫組化SP法檢測非小細胞肺癌中MMP-9的表達后發現其在腫瘤細胞中表達增加，MMP-9的陽性表達率隨著腫瘤病理分級、臨床分期的增設以及淋巴結轉移的出現而表達增加，并認為其是腫瘤浸潤、轉移的促進因子。

筆者的試驗通過免疫組化檢測MMP-9在骨肉瘤中的表達，數據顯示在骨肉瘤中的表達明顯高于良性骨腫瘤，提示MMP-9在骨肉瘤的發生發展中起重要作用。通過臨床病理特征的分析，觀察到與骨肉瘤的軟組織浸潤密切相關，提示MMP-9可能是促進骨肉瘤浸潤性生長的重要因素。由于Ennecking臨床分期與患者預后相關，本試驗也發現MMP-9與其相關，提示MMP-9是與骨肉瘤患都預后有關的重要因素。MMP-9的表達也可以作為判斷腫瘤預后的重要指標。

骨肉瘤的發生是一個多因素多階段的過程，筆者的研究是從MMP-9蛋白表達方面來反映骨肉瘤的生物學行為等因素。另有研究顯示其抑制因子與腫瘤的發生發展有關，今后筆者可以繼續研究MMP-9與抑制因子的關系，以進一步探討骨肉瘤的發生發展。

參 考 文 獻

[1] Polette M，Nawrocki-Raby B，Gilles C，et al.Tumor invasion and matrix metallo- proteinases.Crit Rev Oncol Hemat 2004，49(3)：179-186.

[2] 楊猛，劉霞，趙恭華，等.N-cadherin、MMP-9在直腸癌中表達的臨床意義.腫瘤防治研究.2005，32(2)：105-107.

[3] 徐曉輝，王耿，崔艷紅.MMP-9，EGFR和E-cadherin在非小細胞肺癌中的表達及意義.腫瘤防治研究，2004，31(12)：745-747.