HPLC法測定維生素B12滴眼液中維生素B12的含量

[摘要] 目的 建立高效液相色譜法測定維生素B12滴眼液中的維生素B12的含量的方法。方法 色譜柱為迪馬C18，檢測波長為237nm，流動相為乙腈-0.05mol/L的磷酸二氫鉀(14:86)(用磷酸調PH3.0)，流速為1.0ml/min，柱溫為25℃。結果 維生素B12線性范圍為0.24-0.58μg/m。(r=0.9997)，平均回收率為99.92%(RSD=0.1%)。結論 本方法簡便，快速，準確度高，可用于該制劑的含量測定。

[關鍵詞] 高效液相色譜法;維生素B12;含量測定

[中圖分類號] R977.2+2[文獻標識碼] A[文章編號] 1004-8650(2009)07-027-02

維生素B12的臨床擬用的適應證是抗視疲勞藥。具有重要的親神經性作用，它與中樞及周圍的有髓鞘神經纖維代謝有密切關系，可保持上述纖維功能的完整性。目前雖有不少報道對多組份維生素進行同時測定，但維生素類化學結構復雜，多數穩定性差，異構體種類多，在實際操作中仍是分析測試的難點。本文在參考文獻基礎上，建立了用高效液相色譜法同時測定該制劑中維生素B12含量的方法。結果表明，本方法較簡便，快速，準確度高，可用于控制該制劑的質量。

1儀器與試劑

HPLC采用島津LC-10ATVP型液相色譜儀;SPD-10AVP紫外可見分光光度檢測器;HW-色譜工作站。

維生素B12對照品(中國藥品生物制品檢定所);維生素B12滴眼液(由某企業提供，批號:080601，080602，080603);乙腈為色譜純，其余試劑均為分析純。

2方法與結果

2.1色譜條件

色譜柱:迪馬C18(150mm×4.6mm，5um);檢測波:237nm;流動相:乙腈-0.05mol/L的磷酸二氫鉀(14:86)(用磷酸調PH3.0);流速:1.0ml/min。柱溫:25℃。在該色譜條件下，取“2.2-2.4”項下對照品、供試品、空白輔料溶液進行分析。結果，空白輔料對檢測無干擾，色譜詳見圖1-3。

2.2對照品溶液的制備

準確稱取維生素B12對照品適量，用水溶解制成濃度約為200μg/ml的維生素B12溶液作為貯備液。……