神經干細胞移植對損傷鼠腦ＳＴＡＴ３蛋白和ｂｃｌ－２蛋白表達水平的影響

周鳳剛　鄭永日　解洪軍　呂　鷗　趙　巖　李青松　王建交

[摘要]目的 通過試驗檢測神經干細胞移植后SD大鼠機械性腦損傷局部STAT3蛋白和bcl-2蛋白表達水平的變化,來研究移植入的神經干細胞對損傷后神經細胞的凋亡抑制作用和可能的機制。方法 SPF級SD大鼠40只,隨機分為4組,每組10只。取孕14天的SD胎鼠腦皮質神經干細胞培養至第三代,于損傷后的24小時立體定向注射植入成年SD大鼠腦損傷局部。于移植24小時后取腦組織,免疫組化檢測bcl-2蛋白和Western blot法檢測STAT3蛋白表達的變化差異,進而觀察神經干細胞對細胞凋亡的抑制作用。結果 移植入神經干細胞后,局部STAT3蛋白和bcl-2蛋白的表達都比對照組明顯的增強,差異具有統計學意義。結論 移植入的神經干細胞通過上調STAT3蛋白和bcl-2蛋白的表達,發揮抑制局部神經元的凋亡作用,可將其作為腦損傷的治療方法進一步加以研究。

[關鍵詞]神經干細胞;腦損傷;bcl-2蛋白;STAT3蛋白;細胞凋亡

[中圖分類號]R617 [文獻標識碼] A [文章編號]1004-8650(2009)10-01-04

近年來神經干細胞移植的研究取得了令人矚目的成績,被公認為是治療不可逆性神經損傷的最有效的方法。神經干細胞移植在腦損傷的動物腦內通過多種途徑的明顯改善神經功能[2]。本實驗通過早期分化的神經干細胞移植于腦損傷的動物腦內,取得了同樣有效的結果。

1 材料與方法

1.1 材料

SD大鼠(由哈爾濱獸業研究所提供)。1×PBS液(自配),0.25%的1∶250胰酶PBS溶液,D-hanks 液(自配),胎牛血清(Gibico),B27添加劑(Gibico)b-FGF,堿性成纖維細胞生長因子(PEPROTECH Asia),EGF,表皮細胞生長因子(PEPROTECH Asia)DMEM培……