表皮干細(xì)胞用于瘢痕治療的研究進(jìn)展

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B

【文章編號(hào)】1673－0364（2009）－06－0352－04

doi:10.3969/j.issn.1673-0364.2009.06.017

作者單位：200233上海市　上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第六人民醫(yī)院整形外科。

瘢痕組織是人體創(chuàng)傷修復(fù)過程中的自然產(chǎn)物。在正常的創(chuàng)傷愈合過程中，成纖維細(xì)胞合成和分泌以Ⅰ型膠原纖維為主的細(xì)胞外基質(zhì)，膠原的合成代謝與降解代謝之間維持著平衡狀態(tài),無論是膠原合成的增加或者降解的減少都會(huì)導(dǎo)致膠原的大量堆積，最終導(dǎo)致增生性瘢痕或者瘢痕疙瘩的形成 [1，35]。主要合成和分泌膠原纖維的（肌）成纖維細(xì)胞 [2-3]，在細(xì)胞增殖和凋亡之間也維持著平衡狀態(tài) [4-5]。在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩中這種平衡被破壞，（肌）成纖維細(xì)胞的增殖超過了凋亡，膠原的合成明顯超過降解，最終導(dǎo)致大量的膠原堆積。導(dǎo)致這種變化的確切病因尚不清楚，但是在燒傷患者中，增生性瘢痕往往發(fā)生于延遲愈合的患者身上。采取了網(wǎng)狀皮片移植的患者，常在沒有表皮覆蓋的肉芽組織間發(fā)生增生性瘢痕，在缺乏上皮覆蓋的傷口，真皮內(nèi)的成纖維細(xì)胞會(huì)分泌更多的細(xì)胞外基質(zhì)。臨床觀察的結(jié)果提示，正常的表皮結(jié)構(gòu)對(duì)于瘢痕形成有抑制作用。在皮膚損傷的修復(fù)過程中，表皮干細(xì)胞對(duì)于上皮的修復(fù)起著重要的作用，意味著表皮干細(xì)胞對(duì)于瘢痕的預(yù)防和治療具有積極的意義。

表皮干細(xì)胞主要定位于毛囊外根鞘隆突部及皮膚基底細(xì)胞層 [10]，毛囊外根鞘隆突部是皮膚干細(xì)胞的主要棲存地。表皮干細(xì)胞不但對(duì)毛囊生長(zhǎng)、修復(fù)和新陳代謝起關(guān)鍵作用，且對(duì)表皮損傷后的修復(fù)同樣具有重要意義。表皮干細(xì)胞具有多向分化潛能，可分化為毛干、內(nèi)髓鞘、外髓鞘、和皮膚表皮角質(zhì)細(xì)胞以及皮脂腺等 [1]，創(chuàng)傷修復(fù)后的表皮細(xì)胞也來自于基底層干細(xì)胞或者周圍附屬器內(nèi)的表皮干細(xì)胞的激活和增殖。目前，表皮干細(xì)胞的表面特異性標(biāo)記物尚無定論，但較多采用一些細(xì)胞表面糖蛋白，如整合素家族的Integrinβ1和Integ鄄rinα6、角蛋白K19、基因物質(zhì)P63等作為主要鑒定手段 [10]。近來發(fā)現(xiàn)表皮干細(xì)胞不僅是形成正常表皮增殖單位必不可少的來源，而且相關(guān)實(shí)驗(yàn)證實(shí)了表皮干細(xì)胞在創(chuàng)傷應(yīng)激刺激后快速形成短暫增殖細(xì)胞，然后進(jìn)一步形成角質(zhì)細(xì)胞被快速募集至創(chuàng)面中心完成上皮化過程及創(chuàng)面修復(fù)。正常的上皮化過程對(duì)于傷口愈合十分重要，如果上皮化的持續(xù)時(shí)間超過3周，就會(huì)發(fā)生增生性瘢痕或者瘢痕疙瘩 [36]。

本文對(duì)表皮干細(xì)胞如何通過各種信號(hào)通路的調(diào)節(jié)影響修復(fù)的進(jìn)程和結(jié)果，以及表皮干細(xì)胞如何通過上皮化作用影響傷口愈合而形成瘢痕等問題進(jìn)行綜述。

1　表皮干細(xì)胞參與創(chuàng)傷愈合的信號(hào)通路

1.1 Wnt信號(hào)通路

Wnt信號(hào)通路是動(dòng)物的胚胎發(fā)育和組織器官形成時(shí)期的重要信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，主要通過細(xì)胞與細(xì)胞間的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)細(xì)胞增值、分化、凋亡及抗凋亡過程。Wnt信號(hào)通路主要指經(jīng)典Wnt信號(hào)通路，即Wnt/β-catenine信號(hào)通路和10個(gè)非經(jīng)典的Wnt信號(hào)通路：Wnt/PCP（Planar cell polarity）信號(hào)通路，Wnt-cGMP、Ca 2+信號(hào)通路，Wnt-RAP1信號(hào)通路，Wnt-ROR2信號(hào)通路，Wnt-PKA信號(hào)通路，Wnt-GSK3-MT（Microtubule)信號(hào)通路，Wnt-aPKC信號(hào)通路，Wnt-RYK信號(hào)通路，WntmTOR信號(hào)通路等 [46-47]。Wnt在細(xì)胞膜上有兩種受體：Frizzled受體和脂蛋白受體。細(xì)胞外的Wnt蛋白與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合之后，受體在磷酸化后通過下調(diào)GSK3β將信號(hào)傳遞到細(xì)胞內(nèi)，解除APC蛋白、糖原合成激酶（GSK-3β)、軸素(Axin)、蛋白酶復(fù)合體體對(duì)β-連環(huán)蛋白的抑制，活化之后的β-連環(huán)蛋白進(jìn)入細(xì)胞核，與Lef/Tcf家族的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合，從而激活轉(zhuǎn)錄因子，進(jìn)一步激活靶基因開始轉(zhuǎn)錄。通常情況下，成體哺乳動(dòng)物的Wnt基因在機(jī)體中處于靜息狀態(tài)；皮膚損傷時(shí)，激活了深層皮膚，Wnt基因表達(dá)Wnt蛋白，Wnt蛋白激活隆突部的表皮干細(xì)胞使其增殖、分化以實(shí)現(xiàn)皮膚損傷的修復(fù) [48]。

Fathke等 [49]在傷口局部使用氯化鋰抑制糖原合酶激酶3GSK-3β使β-catinen積聚，從而增強(qiáng)Wnt信號(hào)通路表達(dá)，發(fā)現(xiàn)毛囊間表皮細(xì)胞再生模式被改變，表皮創(chuàng)傷愈合面形成包含有毛囊結(jié)構(gòu)和皮脂腺結(jié)構(gòu)表皮囊腫。這說明表皮細(xì)胞在受到增強(qiáng)的Wnt信號(hào)誘導(dǎo)后可以轉(zhuǎn)化為類似毛囊的形態(tài)，是Wnt信號(hào)決定了皮膚細(xì)胞分化的方向。在細(xì)胞核內(nèi)，Lef/Tcf家族不同的因子在通路中發(fā)揮不同作用，在正常毛囊干細(xì)胞中，Tcf3的表達(dá)被抑制而正常表達(dá)Lef1，Lef1與β-catinen協(xié)同作用促使短暫增殖細(xì)胞進(jìn)一步分化形成內(nèi)毛根鞘。當(dāng)毛囊干細(xì)胞內(nèi)β-catinen在胞質(zhì)表達(dá)穩(wěn)定時(shí)，Tcf3的抑制被解除，毛囊干細(xì)胞被激活，分化并參與毛囊和表皮的增殖再生 [50]。

1.2 FGF信號(hào)通路

FGF家族成員擁有由大約120個(gè)同源氨基酸殘基序列組成的核心區(qū)域，F(xiàn)GF受體為絡(luò)氨酸激酶受體，分為FGFR1、FGFR2、FGFR3、FGFR4等亞型，各亞型都具有細(xì)胞外的免疫球蛋白樣結(jié)構(gòu)域和細(xì)胞內(nèi)的絡(luò)氨酸激酶結(jié)構(gòu)域。FGF與硫酸乙酰肝素粘多糖緊密結(jié)合后，與細(xì)胞膜上的絡(luò)氨酸激酶受體結(jié)合，受體形成二聚體，細(xì)胞內(nèi)的絡(luò)氨酸激酶活化，受體自身啟動(dòng)磷酸化過程 [51]?；罨氖荏w通過FRS2-GRB2-GAB1-PI3KAKT信號(hào)級(jí)聯(lián)放大通路，最終下調(diào)GSK3β的表達(dá)，解除βcatenin的抑制，活化后的β-連環(huán)蛋白進(jìn)入細(xì)胞核，與Lef/Tcf家族的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合，從而激活轉(zhuǎn)錄因子，進(jìn)一步激活靶基因轉(zhuǎn)錄。FGF信號(hào)通路通過該途徑與Wnt信號(hào)途徑相互作用，調(diào)節(jié)毛囊中表皮干細(xì)胞的分化方向，在創(chuàng)傷修復(fù)中起重要作用。

FGF最初是作為成纖維細(xì)胞或上皮細(xì)胞生成促進(jìn)因子被發(fā)現(xiàn)的，現(xiàn)已明確它們?cè)诩棺祫?dòng)物胚胎形成過程具有調(diào)節(jié)干細(xì)胞發(fā)育方向的功能。Stern等 [52]使用外源性方法阻斷小鼠胚胎發(fā)育中的外胚層對(duì)成纖維生長(zhǎng)因子（FGFs）的反應(yīng)，沒有FGFs表達(dá)的細(xì)胞中骨形成蛋白（MBPs）的表達(dá)增強(qiáng)，促使神經(jīng)外胚層向神經(jīng)分化受抑制，而分化成胚胎表皮。Kawano等 [53-54]對(duì)小鼠全層皮膚中的mRNA進(jìn)行定量分析以了解FGF家族的22個(gè)成員及其受體的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)FGF1、FGF2、FGF5、FGF7、FGF10、FGF13、FGF18、FGF22在皮膚中表達(dá)于毛囊增殖周期的不同階段，不同的FGF有著不同的表達(dá)高峰，其中FGF18能促進(jìn)體外培養(yǎng)的人成纖維細(xì)胞、毛囊隆突細(xì)胞、表皮角質(zhì)細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞的DNA合成，對(duì)毛囊形成及毛囊干細(xì)胞參與創(chuàng)面修復(fù)過程有重要促進(jìn)作用。應(yīng)用RT-PCR和原位雜交檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)GF13 mRNA在毛囊再生和創(chuàng)傷修復(fù)中表達(dá)水平增高，免疫組化檢測(cè)提示FGF13蛋白僅在毛囊隆突區(qū)域表達(dá)。FGF13可能在調(diào)節(jié)毛囊bulge細(xì)胞以及表皮基底層細(xì)胞的功能上發(fā)揮作用

1.3 BMP/TGF-β信號(hào)通路

骨形態(tài)發(fā)生蛋白（BMPs）是TGF-β超家族成員中最大的一族，通過調(diào)節(jié)一群廣泛多樣的基因活性，控制著機(jī)體組織器官的基本發(fā)育過程。BMPs與BMPⅡ型受體結(jié)合，Ⅱ型受體其胞質(zhì)段的絲氨酸/蘇氨酸激酶結(jié)構(gòu)域活性升高，能持續(xù)作用使Ⅱ型受體磷酸化Ⅰ型受體，磷酸化后的Ⅰ型受體又能使轉(zhuǎn)錄因子Smad磷酸化，并與Smad結(jié)合構(gòu)成復(fù)合物進(jìn)入核內(nèi)，啟動(dòng)下游靶基因的表達(dá) [55]。Smads蛋白是TGF-β1家族傳遞受體信號(hào)到細(xì)胞核內(nèi)的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子，是目前所知唯一的激酶受體激活后在細(xì)胞內(nèi)的底物。受體激活型Smad1、Smad2、Smad3、Smad5、Smad8，可被Ⅰ型受體特異的絲氨酸激酶磷酸化而活化，然后才能與Co-Smad（即Smad4）結(jié)合并形成復(fù)合物，轉(zhuǎn)移到核內(nèi)調(diào)控轉(zhuǎn)錄。Smad6和Smad7屬于抑制性Smads，可與活化的Ⅰ型受體競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合，阻止其他類型Smads的磷酸化，從而抑制信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) [56]。

在毛囊增殖周期中，處于真皮中的BMP2、BMP4也隨之發(fā)生周期性改變，在毛囊的退行期BMP2、BMP4呈高表達(dá)，在毛囊周期的恒定增殖期卻處于低表達(dá)水平，這正好與Wnt/β-catinen在毛囊周期中相同時(shí)期的表達(dá)相反。BMP在毛囊干細(xì)胞周圍的穩(wěn)定表達(dá)可維持毛囊干細(xì)胞的靜息狀態(tài)，阻止了毛囊干細(xì)胞的激活，卻可以促進(jìn)毛囊角質(zhì)細(xì)胞的進(jìn)一步分化而促使毛囊分化成熟 [57]。Smad4主要通過激活細(xì)胞凋亡通路來維持TGF信號(hào)誘導(dǎo)毛囊進(jìn)入退行期，BMP和Wnt/β-catinen兩條信號(hào)通路相互制衡以調(diào)節(jié)毛囊干細(xì)胞毛囊周期和表皮再生。

1.4 Notch信號(hào)通路

Notch基因編碼一種膜蛋白受體，它的兩種膜蛋白配體Delta和Serrate表達(dá)在相鄰細(xì)胞的細(xì)胞膜上。當(dāng)配體和Notch的胞膜外區(qū)結(jié)合時(shí)，Notch的胞內(nèi)區(qū)(Intracellular domain of Notch，ICN)被金屬蛋白酶（MMP）或γ分泌酶切割，脫離細(xì)胞膜成為具有活性的游離狀態(tài)?；罨腎CN被轉(zhuǎn)運(yùn)入細(xì)胞核并與Su（H）（Suppressor of Hairless）即RBP-Jκ結(jié)合，Su（H）單獨(dú)存在時(shí)是一種抑制性的轉(zhuǎn)錄因子，ICN的結(jié)合使Su（H）轉(zhuǎn)變?yōu)檗D(zhuǎn)錄激活子，激活Notch誘導(dǎo)基因（Notch2 inducible genes）的轉(zhuǎn)錄。ICN-Su（H）復(fù)合物直接誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄的靶基因是E（spl）（Enhancer of Split），E（spl）是堿性螺旋-環(huán)-螺旋（basic helix2loop2helix，bHLH）類轉(zhuǎn)錄因子，它又調(diào)節(jié)其他與細(xì)胞分化直接相關(guān)的基因的轉(zhuǎn)錄 [64]。Notch信號(hào)通路通過參與Wnt信號(hào)的下游通路決定著表皮干細(xì)胞的分化方向。

其他調(diào)節(jié)表皮干細(xì)胞參與創(chuàng)傷修復(fù)的信號(hào)通路還有MAPK通路、鈣粘蛋白-NFATc1-CDK4通路等，它們之間具有復(fù)雜的交聯(lián)關(guān)系，在毛囊干細(xì)胞參與創(chuàng)傷修復(fù)的過程中相互聯(lián)系構(gòu)成一個(gè)網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)。毛囊干細(xì)胞通過一系列復(fù)雜的調(diào)節(jié)最終完成傷口的上皮化。研究結(jié)果表明，阻斷通路的某些步驟或者改變某些關(guān)鍵信號(hào)分子的含量，可以實(shí)現(xiàn)對(duì)于表皮干細(xì)胞分化的調(diào)控，而有望實(shí)現(xiàn)創(chuàng)傷無瘢痕愈合。

2　上皮化過程對(duì)于成纖維細(xì)胞的影響

創(chuàng)傷的愈合過程分為3個(gè)階段：炎癥反應(yīng)階段、增殖階段以及塑形階段 [6-7]。在傷口的上皮化過程中，根據(jù)傷口深度的不同，上皮化的方式有所不同。如果皮膚的基底層是完整的，缺損的表皮由皮膚基底細(xì)胞層內(nèi)的表皮干細(xì)胞以自下向上分化增殖的方式進(jìn)行修復(fù)。如果皮膚的基底層受到破壞，傷口則由傷口邊緣附屬器內(nèi)的表皮干細(xì)胞向傷口方向分化、增殖、遷移而進(jìn)行修復(fù) [8-10]。

正常的上皮化過程對(duì)于傷口的正常愈合十分重要，如果上皮化的持續(xù)時(shí)間超過3周，就會(huì)發(fā)生增生性瘢痕或者瘢痕疙瘩 [36]，表皮細(xì)胞在表皮化的過程中受到來自表皮細(xì)胞自身以及真皮層的多重調(diào)節(jié)。表皮細(xì)胞遷移、增值、分化的過程通過可溶性的細(xì)胞因子以旁分泌、自身分泌的形式相互作用 [14]。傷口形成之后，表皮細(xì)胞分泌儲(chǔ)存的IL-1α，IL-1α活化成纖維細(xì)胞和鄰近的表皮細(xì)胞，趨化內(nèi)皮細(xì)胞和淋巴細(xì)胞到創(chuàng)傷區(qū)域 [15]。成纖維細(xì)胞依次分泌FGF7、GM-CSF，進(jìn)一步活化基底層附近的表皮細(xì)胞，活化過程同時(shí)受到來自創(chuàng)面的巨細(xì)胞、表皮細(xì)胞、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞所分泌的TNF-α EGF家族（TGF-a、EGF、HG-EGF）、CXCL8和IFN-g的調(diào)控 [15-16]。在傷口正常上皮化過程結(jié)束后活化停止，但是在增生性瘢痕中表皮細(xì)胞在上皮化結(jié)束后仍然處于活化狀態(tài) [17-19]。受傷后24 h，表皮細(xì)胞在巨噬細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、表皮細(xì)胞分泌的TGF-b1、HB-EGF、EGF、TGF-a、HGF、NGF、FGF7、VEGF、CXCL1、IL-6 和GM-CSF作用下開始增殖 [20-22]。沒有來自于成纖維細(xì)胞的信號(hào)，表皮細(xì)胞無法形成具有功能的上皮 [23]。增殖階段結(jié)束后，表皮細(xì)胞在FGF7和GM-CSF刺激下開始分化 [24]。與愈合早期不同，在愈合終末期，成纖維細(xì)胞分泌的TGF-β誘導(dǎo)表皮細(xì)胞由活化狀態(tài)轉(zhuǎn)化為失活狀態(tài) [15]，失活的表皮細(xì)胞又誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞減少膠原的生成 [25-26]。和正常瘢痕組織內(nèi)的表皮細(xì)胞相比，增生性瘢痕內(nèi)表皮細(xì)胞的增殖和分化能力都有不同程度的提高 [18，27]?；钚栽鰪?qiáng)的表皮細(xì)胞減少了IL-1的分泌并提高PDGF的表達(dá)，從而直接促進(jìn)了成纖維細(xì)胞膠原的合成與分泌 [28]。在體外聯(lián)合細(xì)胞培養(yǎng)中，瘢痕疙瘩來源的活化的成纖維細(xì)胞可以誘導(dǎo)正常皮膚的成纖維細(xì)胞大量合成CTFG、TGF-β、VEGF [39-31]，并且促進(jìn)膠原合成與分泌 [32-33]。

3　干細(xì)胞應(yīng)用于瘢痕治療的研究進(jìn)展

表皮干細(xì)胞的增殖分化行為，一方面被細(xì)胞本身所預(yù)先程序化，另一方面又受其所處的微環(huán)境（干細(xì)胞壁龕）的影響，即干細(xì)胞壁龕通過細(xì)胞與細(xì)胞、細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)兩種方式調(diào)控干細(xì)胞的增殖分化，細(xì)胞因子在傳遞細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)之間、細(xì)胞與細(xì)胞之間的信息中起重要作用，細(xì)胞外基質(zhì)成分，如纖維結(jié)合蛋白、層黏連蛋白以及不同類型的膠原等均參與了表皮干細(xì)胞特征的維持及其增殖、分化等生物學(xué)行為的調(diào)控 [40]。

表皮干細(xì)胞在瘢痕治療方面的研究及應(yīng)用進(jìn)展主要集中在兩個(gè)方面。

①應(yīng)用EGF促進(jìn)傷口原位的表皮干細(xì)胞生長(zhǎng)，加速上皮化的過程。

表皮干細(xì)胞在傷口上皮化過程中起著重要作用。許多調(diào)節(jié)因子，例如細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)并且調(diào)節(jié)傷口原位表皮干細(xì)胞的聚集、增殖和分化，以此促進(jìn)傷口上皮化和傷口愈合。Ghalbzouri等 [41]用手術(shù)刀在皮膚（HSE）上制造全層損傷，部分創(chuàng)面給予外源性生長(zhǎng)因子，觀察傷口上皮化的速度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：表皮生長(zhǎng)因子（EGF）的表達(dá)可以促進(jìn)角質(zhì)化細(xì)胞的遷移和增殖，進(jìn)而加速傷口的上皮化過程。單細(xì)胞層傷口的愈合速度取決于細(xì)胞數(shù)量的增加。另有實(shí)驗(yàn)表明：外源性的表皮生長(zhǎng)因子(EGF)可以提高單個(gè)細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)能力，促進(jìn)單層傷口的愈合速度 [42]。

黃暉等 [38]發(fā)現(xiàn)，感覺神經(jīng)肽P物質(zhì)能明顯加速創(chuàng)面愈合速度，并具有誘導(dǎo)表皮干細(xì)胞向創(chuàng)緣集中和向創(chuàng)面肉芽組織中遷移的作用。付小兵等 [39]報(bào)道，表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子可通過誘導(dǎo)皮膚干細(xì)胞增殖、分化而加速受創(chuàng)表皮再生；而經(jīng)重組人表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子治療的慢性皮膚潰瘍，在修復(fù)創(chuàng)面過程中，可見表皮棘細(xì)胞層有少量表皮干細(xì)胞島，初步認(rèn)為可能是由成熟的表皮細(xì)胞逆分化而來，其中EGF是一個(gè)重要的誘導(dǎo)因素。這一結(jié)果不僅使人們對(duì)EGF促進(jìn)創(chuàng)面愈合的機(jī)制產(chǎn)生了新認(rèn)識(shí)，而且可能為將來利用表皮干細(xì)胞進(jìn)行皮膚功能性修復(fù)提供了新思路。

除了外源性生長(zhǎng)因子對(duì)于上皮化的促進(jìn)作用，相關(guān)研究表明傷口附近的角質(zhì)化細(xì)胞分泌的內(nèi)源性生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子可以加速傷口上皮化的過程。Myers等 [21]的研究認(rèn)為，提高傷口處生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子的表達(dá)水平，可以活化毛囊和表皮內(nèi)的表皮干細(xì)胞，加快上皮化，最終促進(jìn)傷口的愈合。

②利用表皮干細(xì)胞通過組織工程技術(shù)構(gòu)建組織工程皮膚，覆蓋傷口以加速上皮化。

大面積燒傷患者，往往采用創(chuàng)面斷層皮片移植的方法覆蓋創(chuàng)面，以促進(jìn)傷口愈合并減少瘢痕形成。但是自體取皮會(huì)造成供皮區(qū)損傷，而且還存在著供區(qū)不足的問題 [43]。利用患者自身的表皮細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，形成連續(xù)的大張表皮之后，將其從培養(yǎng)皿上小心取下，直接覆蓋于燒傷或者潰瘍傷口表面 [44]，這種方法培養(yǎng)時(shí)間過長(zhǎng)，而且培養(yǎng)獲得的表皮比較脆，表皮與傷口的粘附效果亦欠佳。利用組織工程技術(shù)，在體外將大量培養(yǎng)的表皮干細(xì)胞種植在富含成纖維細(xì)胞的膠原海綿表面，構(gòu)建組織工程皮膚，并移植到裸鼠皮膚的全層傷口處覆蓋傷口，結(jié)果顯示，經(jīng)此處理的傷口比未經(jīng)處理的傷口愈合快，瘢痕也較輕微 [46]。

4　展望

隨著表皮干細(xì)胞研究的深入，應(yīng)用表皮干細(xì)胞治療增生性瘢痕以及瘢痕疙瘩有著廣闊前景，但是調(diào)節(jié)表皮干細(xì)胞分化的通路十分復(fù)雜，利用調(diào)節(jié)通路的方法實(shí)現(xiàn)創(chuàng)傷無瘢痕愈合等問題仍需更深入的研究。臨床應(yīng)用前必須解決在體外快速、足量獲得干細(xì)胞的問題，將來能夠通過分離、純化表皮干細(xì)胞，精度調(diào)控其增殖分化以及關(guān)鍵信號(hào)通路等手段實(shí)現(xiàn)創(chuàng)面的無瘢痕愈合。