新城疫活疫苗ＨＢ９２克隆株的篩選、純化與細(xì)胞培養(yǎng)特性觀察

青平 張蓉蓉 羅 玲 廖永洪

摘要：將引進(jìn)的新城疫V4無毒耐熱毒株連續(xù)用雞胚傳代，每次挑選48～96h有明顯病變的死亡雞胚，取其尿囊液毒于-20℃保存，觀察V4毒株對雞胚毒力的病理變化。結(jié)果顯示，經(jīng)過20代次的雞胚毒力篩選，V4毒株對雞胚的致死率從小于10％上升至20％以上，接種后120h的活胚有明顯地萎縮癥狀。將雞胚20代次以上篩選的V4病毒液在雞胚成纖維細(xì)胞上傳代培養(yǎng)，并進(jìn)行蝕斑篩選純化病毒，直到第5代才出現(xiàn)明顯地細(xì)胞病變。使用二層瓊脂進(jìn)行病毒的蝕斑分析。第二層瓊脂糖在第一層凝固后72h覆蓋，8h后NDV雞胚成纖維細(xì)胞適應(yīng)株的蝕斑出現(xiàn)，蝕斑大小直徑在1～2mm變化。通過對NDV V4雞胚毒力篩選和蝕斑純化，獲得了一株蝕斑克隆株(NDV HB92)。

關(guān)鍵詞：新城疫HB92克隆株；病毒純化；細(xì)胞培養(yǎng)特性

中圖分類號：S852.65⁺9.5；Q93-331；S852.4

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：0439—8114(2009)06—1436—04