采用正交設計方法優化梨ＩＳＳＲ—ＰＣＲ反應體系
2008-12-31 00:00:00曾艷玲譚曉風曾曉峰
湖北農業科學 2008年11期
摘要：采用正交設計的方法對梨ISSR—PCR反應體系的5因素(Taq DNA聚合酶、Mg2+、模板DNA、dNTPs、引物的濃度)在4水平上進行優化試驗，PCR結果用DPS數據處理軟件分析，建立的梨ISSR—PCR的最佳反應體系(20μL)為：Taq DNA聚合酶1.0U、Mg22+的濃度2.0 mmol·L-1、模板DNA 10～80ng、 dNTPs 0.10mmol·L-1、引物0.3μmol·L。對梨ISSR—PCR最佳反應體系進行了梯度退火試驗，得到的最佳退火溫度為55℃。
關鍵詞：梨；正交設計；ISSR—PCR
中圖分類號：S114；Q503；S661.2 文獻標識碼：A 文章編號：0439—8114(2008)11—1235—03
