肉雛鴨病毒性肝炎的診治

中圖分類號：S858.325.3 文獻標識碼：B 文章編號：1007-273X(2008)07-0029-02

鴨病毒性肝炎是雛鴨的一種傳播迅速的急性傳染病。此病病程短，死亡率高。一年四季都可發生，但多數在冬季或早春暴發。

1 發病情況及臨床癥狀

2008年2月28日，山東濱州沾化縣一肉鴨養殖戶帶12只7日齡病死鴨到我院獸醫診斷中心就診。據養鴨戶介紹，其飼養的這批肉雛鴨共2 100只，進雛時小鴨無任何臨床癥狀，表現非常健康。養鴨戶從進雛開始在飲水中加入氟哌酸、多維電解質和葡萄糖。連用3d。6日齡時有部分肉雛鴨沒有任何癥狀而突然死亡。部分病鴨離群，縮頭拱背，行動呆滯，不久即伏地不能走動，食欲廢絕，眼半閉呈昏迷狀態。個別鴨子有腹瀉癥狀，隨著病程發展，出現神經癥狀，運動不協調，雙腳呈痙攣性運動，頭向后仰，似游泳狀，翅膀下垂，張口伸頸呼吸，死前頭頸扭曲于背上，腿伸直向后張開，呈角弓反張姿勢。

2 剖檢變化

肝臟腫大、容易撕裂，質脆，呈土黃色、褐黃色、黃白色，肝表面有大小不等的深紫色出血點、斑狀條紋或壞死灶；膽囊腫大，膽汁稀薄：脾臟、腎臟也有不同程度腫大、充血、出血；胰臟充血成粉紅色，心肌質軟呈熟肉樣；腦充血、水腫。其他器官無明顯變化。

3 實驗室診斷

3.1 細菌分離

無菌采集病死鴨肝、脾臟組織，分別接種麥康凱瓊脂和鮮血瓊脂平板上，置37℃恒溫箱中培養24h。

診斷結果：在麥康凱瓊脂和鮮血瓊脂平皿上均無細菌生長，可排除傳染性漿膜炎等細菌病繼發感染。

3.2 病毒分離

3.2.1 病料采集 無菌取患病雛鴨典型肝臟病料放置于滅菌的玻璃瓶。凍結保存作為病毒分離材料。

3.2.2 病料處理 取病鴨肝組織，用組織研磨器磨碎后，用滅菌的生理鹽水制成1：4的懸液后反復凍融3次。3000r/min離心20min，取上清液，加人青、鏈霉素各2 000IU/mL，4℃過夜備用。

3.2.3 胚胎接種 將病毒分離材料接種11～13日齡易感鴨胚或10～11日齡雞胚6-8枚，每胚尿囊腔接種0.1-0.2mL。鴨胚一般48～96h后死亡。雞胚死亡差異較大，較不穩定，通常在接種后96～120h死亡。胚胎特征性病變是胚體生長停滯，全身皮膚和皮下充血、出血，腹部和股部皮下發生水腫，尿囊液增多和變為淡綠色。肝臟腫大，呈淡綠色或紅黃色。表面有淡黃色的壞死灶。死亡時間較長的胚胎中，尿囊液明顯變綠，肝臟病變和胚胎發育受阻更加明顯。雞胚在接種后60、72、96、120h分別死亡2只、2只、1只、3只，其他一直到21日齡還存活，剖檢死亡胚體，觀察病變：尿囊液少而清亮，呈淡綠色；胚體頸部水腫、輕微出血，較脆，稍碰即碎；肝臟呈墨綠色，有點狀壞死灶。與對照組相比。21日齡存活雞胚普遍呈現典型侏儒胚癥狀。

3.2.4 易感雛鴨接種 用病毒分離材料或鴨胚或雞胚分離毒株的尿囊液接種5～10只，1-7日齡易感雛鴨每只皮下或肌肉注射0.2～0.5mL。接種24h后開始發病和死亡，并具有典型臨床癥狀和病理變化。

3.2.5 細胞培養 在單層鴨胚肝細胞接種病毒分離材料，在室溫吸附15min，加入細胞營養液于37％溫箱培養觀察。有細胞變圓等病變。

3.3 血清學診斷方法

3.3.1 保護試驗 用已知抗鴨病毒性肝炎高免血清或抗鴨病毒性肝炎特異蛋黃抗體注射5只1～7日齡易感健康的雛鴨，每只雛鴨皮下注射1-2mL，12～24h后用≥10³ LD₅₀的病毒分離物或尿囊液皮下或肌肉注射攻毒。未注射抗血清的5只對照組雛鴨同時攻毒。經7d飼養觀察，結果注射特異抗體組的雛鴨有80％～100％存活，而對照組雛鴨有80％～100％死亡。由此，可判定分離毒株為鴨肝炎病毒。

3.3.2 被動免疫試 驗取經鴨肝炎病毒免疫種鴨的1～5日齡雛鴨5只(含母源抗體)和5日齡易感雛鴨10只。進行LD₅₀的病毒分離物攻毒。經7d飼養觀察，結果免疫組有80％～100％雛鴨存活，而對照組有80％～100％死亡，即可判定分離毒株為鴨肝炎病毒。

3.4 病毒血凝效價測定

按常規微量血凝試驗方法測定病毒的血凝效價。

3.5 病例復制試驗

取48h后死亡的雞胚尿囊液，經生理鹽水10倍稀釋后，用一次性微孔濾除菌，置于4℃冰箱備用。取6日齡雛鴨20只，分為兩組，試驗組15只，頸部皮下注射上述稀釋液0.1mL/只：對照組5只，頸部注射滅菌生理鹽水0.1mL/只。

診斷結果：接種稀釋尿囊液的雛鴨在第3天發病死亡7只，第4天死亡5只，第5天死亡3只，對照組無一死亡。死亡前病鴨主要表現為：突然發病，兩腿向上亂蹬，呈游泳狀，頭部向后仰彎曲到背部，呈背脖狀，表現為明顯的角弓反張狀態；高聲嗚叫，叫聲凄慘。剖檢死亡雛鴨，其肝臟呈黃色腫大，有明顯的出血斑，脾臟、腎臟也有不同程度腫大、充血、出血；胰臟充血成粉紅色，心肌質軟呈熟肉樣；其他無明顯病變。對照組健活。

4 鑒別診斷

4.1 與鴨瘟鑒別

鴨瘟是由鴨瘟病毒引起鴨的一種高死亡率的急性傳染病。雖然各種日齡的鴨均可感染發病，但3周齡以內的雛鴨較少發生死亡，而病毒性鴨肝炎對1～2周齡易感雛鴨有極高的發病率和致死率，超過3周齡雛鴨不發病，這在流行病學上是重要鑒別之一。從患鴨瘟的鴨食道、泄殖腔和眼瞼黏膜呈出血性潰瘍和假膜為主要特征性病變，與鴨病毒性肝炎完全不同，可作為重要鑒別之一。用抗鴨瘟病毒高免血清和抗鴨病毒性肝炎高免血清，在易感1-7日齡雛鴨作交叉中和試驗，或交叉保護試驗，可作為重要鑒別之二。必要時用鴨胚和雞胚作病毒分離檢驗。

4.2 與鴨巴氏桿菌病鑒別

鴨巴氏桿菌病是由多殺性巴氏桿菌引起的急性敗血性傳染病，發病率和死亡率很高。青年鴨、成年鴨比雛鴨更易感，尤其是3周齡以內的雛鴨很少發生，這在流行病學上是重要鑒別之一。患巴氏桿菌病的鴨肝臟腫大，有灰白色針尖大的壞死灶和心冠溝脂肪組織有出血斑，心包積液，十二指腸黏膜嚴重出血等特征性病變，與鴨病毒性肝炎完全不同，可作為重要鑒別之二。肝臟觸片，心包液涂片，革蘭氏或美藍染色見有許多兩極染色的卵圓形小桿菌。用肝臟和心包液接種鮮血培養基能分離到巴氏桿菌，而鴨病毒性肝炎均為陰性，可作為重要鑒別之三。

5 防治措施

(1)為預防該病發生，平時應嚴格孵化室、鴨舍及周圍環境的衛生消毒。

(2)1～3日齡雛鴨，每只皮下注射山東綠都生物科技有限公司生產的雛鴨病毒性肝炎精制抗體0.5mL。

(3)對發病鴨立即進行隔離和消毒。肌肉注射高免血清，每只注射0.5mL。在飲水中加入山東綠都安特動物藥業有限公司生產的電解多維。

(4)中草藥防治法：板蘭根、黃芩、蒲公英、地丁各100g，茵陳、地骨皮、夏枯葉各120g，連翹80g，柴胡、升麻各70g。蒼術、白術各40g，共同粉碎后按每只鴨每日3g的量加入飼料中飼喂。連用5～7d。