禽流感

摘要：選昌偉農貿公司健康雞400只(試驗前抗體監測新城疫抗體效價小于或等于1：32。禽流感抗體效價小于1：16的雞為試驗雞)分4組，分別用滴鼻1羽份、肌肉注射1羽份、飲水2羽份、肌注1羽份3周后飲水2羽份加強免疫4種方式免疫，結果顯示：禽流感一新城疫重組二聯疫苗滴鼻、肌肉注射免疫的抗體效價合格率顯著高于飲水免疫的抗體效價合格率(P＜0.05)，肌肉注射3周后飲水加強免疫一次能顯著延長有效抗體持續期，能夠產生更好的免疫效果。一次滴鼻、肌肉注射和飲水免疫僅能維持1個月左右的高抗體水平，加強免疫方式能維持2個月以上的高抗體水平。

關鍵詞：滴鼻；肌注；飲水；免疫預防；雞；禽流感；新城疫

中圖分類號：S852.5⁺2 文獻標識碼：A 文章編號：1007-273X(2008)07-0023-02

1 材料方法

1.1 材料

1.1.1 試驗動物 夷陵區昌偉農貿公司3周齡未接種疫苗健康雛雞400只(試驗前抗體監測新城疫抗體效價小于或等于1：32，禽流感抗體效價小于1：16的雞為試驗雞)。

1.1.2試驗疫苗 禽流感一新城疫重組二聯活疫苗500羽份/瓶，哈爾濱維科生物技術開發公司生產，批號：獸藥生字(2007)080012112。

1.1.3試驗試劑 純化滅活禽流感(H5)、新城疫診斷抗原，標準陽性、陰性血清，稀釋液(PBS)，由中國農業科學院哈爾濱獸醫研究所生產。

1％雞紅血球：采健康公雞新鮮血液，與抗凝生理鹽水等體積混合。洗滌離心后備用。

1.2 方法

1.2.1 試驗分組與疫苗接種

(1)試驗分組。選擇未接種禽流感一新城疫疫苗的健康雞400只，分成4組：第1組：健康雞100只，2007年3月22日采用滴鼻免疫方式免疫禽流感一新城疫疫苗1羽份/羽。第2組：健康雞100只，2007年3月22日采用肌肉注射免疫方式免疫禽流感一新城疫疫苗1羽份/羽。第3組：健康雞100只，2007年3月22日采用飲水免疫方式免疫禽流感一新城疫疫苗2羽份/羽。第4組：健康雞100只，2007年3月22日采用肌肉注射免疫方式免疫禽流感一新城疫疫苗1羽份/羽，21d后飲水免疫2羽份/羽(表1)。

(2)接種操作規范與注意事項。點眼滴鼻：用稀釋液稀釋疫苗到1羽份/0.1mL，每只雛雞滴鼻0.1mL。肌肉注射：腿部肌肉注射稀釋好的疫苗0.2mL(含1羽份)。飲水免疫：按2羽份/羽劑量計算雞群用量后加入飲水中。飲水免疫前雞群應至少停水4h，忌用金屬飲水容器。使用疫苗注意事項：注射器應采用7號以下規格針頭，該疫苗接種前后

2周內應絕對避免其他形式使用疫苗。

1.2.2 免疫反應觀測 試驗期間，安排專業獸醫人員記錄疫苗使用后過敏反應癥狀、治療方案、轉歸、劃分應激反應類型，對嚴重應激反應者用腎上腺素及時救治。

1.2.3 血清采集將試驗雞分別于免疫前、免疫后第21天、第36天、第66天翅靜脈采血2mL/只，靜置分離血清0.5mL/只，待用。

1.3 抗體效價測定方法

測定方法：本次試驗禽流感一新城疫抗體監測均采用血凝抑制試驗。

2 結果與分析

試驗雞禽流感和新城疫抗體效價測定在疫苗免疫前、免疫后第21天、第36天、第66天分別測定，禽流感抗體效價大于或者等于1：16為合格，新城疫抗體效價大于1：32為合格。

2.1 試驗結果

由表1可見，用禽流感一新城疫重組二聯疫苗一次免疫方式滴鼻組(1組)、肌肉注射組(2組)免疫后抗體檢測顯示21d雞群新城疫抗體合格率為72％、82％。禽流感抗體合格率為68％、71％；36d新城疫抗體合格率為86％、90％，禽流感抗體合格率為72％、72％；66d新城疫抗體合格率為41％、44％，禽流感抗體合格率為27％、34％。而飲水免疫(3組)21、36、66d新城疫抗體合格率僅為52％、65％、31％。禽流感抗體合格率僅為37％、44％、21％。

加強免疫組(4組)的新城疫抗體檢測結果顯示，加強免疫組的抗體合格率21d、36d、66d達到78％、96％、87％，禽流感抗體合格率為67％、84％、72％。而滴鼻、肌肉注射和飲水免疫組(1組、2組、3組)21d新城疫抗體合格率分別為72％、82％、52％，禽流感抗體合格率為68％、71％、37％；36d新城疫抗體合格率為86％、90％、65％，禽流感抗體合格率為72％、72％、44％；66d新城疫抗體合格率為41％、44％、31％，禽流感抗體合格率為27％、34％、21％。

2.2 不同免疫方式抗體消長規律

禽流感一新城疫疫苗滴鼻免疫方式(1組)與肌肉注射(2組)的新城疫抗體合格率和免疫持續期相近，經差異顯著性檢驗，差異不顯著(P＞0.05)。滴鼻組、肌肉注射組顯著高于飲水免疫組(3組)的新城疫抗體合格率，經差異顯著性檢驗，差異顯著(P＜0.05)。加強免疫組(4組)顯著高于滴鼻組、肌肉注射組和飲水免疫組的抗體合格率，經差異顯著性檢驗，差異顯著(P<0.05)。加強免疫后第45天仍能維持較高的抗體水平，一次免疫都只能維持1個月的高抗體水平。試驗表明：無論哪種免疫方式，一次免疫僅能維持1個月左右的免疫持續期，而加強免疫能維持2個月以上的免疫持續期(見圖1)。

禽流感的抗體合格率變化基本上與新城疫抗體合格率變化趨勢一致。在免疫后第2l天、36天、66天滴鼻(1組)、肌肉注射(2組)免疫方式的免疫效果明顯優于飲水(3組)免疫方式，加強免疫(4組)的免疫方式與常規單次免疫方式相比，在二免后15d能達到較高的抗體合格率，并且維持的時間長，在加強免疫后45d時，加強免疫的抗體合格率明顯高于一次免疫的抗體合格率(見圖2)。

3 小結與討論

3.1 禽流感一新城疫重組二聯疫苗不同免疫方式效果比較

禽流感一新城疫重組二聯疫苗滴鼻、肌肉注射免疫的抗體效價合格率顯著高于飲水免疫的抗體效價合格率，肌肉注射3周后飲水加強免疫一次能顯著延長有效抗體持續期。能夠產生更好的免疫效果。

3.2 加強免疫與常規單次免疫效果的比較

加強免疫優于常規單次免疫效果。禽流感一新城疫重組疫苗盡管滴鼻、肌肉注射方式的抗體合格率顯著高于飲水免疫方式，但3種免疫方式有效抗體持續期均只能達到1個月左右。而加強免疫方式有效抗體持續期能達到2個月以上。試驗表明：1次滴鼻、肌肉注射和飲水免疫僅能維持1個月左右的高抗體水平。加強免疫方式能維持2個月以上的高抗體水平。

3.3 小結

根據本試驗所反應出來結果，建議生長周期短的肉雞采用滴鼻或肌肉注射免疫方式免疫，生長周期長的種雞和蛋雞采用加強免疫的方式進行免疫。由于各種雞的生長期不同，我們可以采用不同的免疫方式進行免疫，如飼養肉雞，生長期只有40d左右，我們采用一次滴鼻或肌肉注射就能夠達到滿意的免疫效果。如果飼養種雞或蛋雞，生長期在1年以上，我們就有必要采用加強免疫的方式免疫，以延長保護期。