摘要:對鄂西北地區47個豬場采樣342份血清,進行了PCV-2檢測,結果表明:血清抗體陽性率為80.4%,陰性率為19.6%,鄂西北地區圓環病毒流行面廣,疫情感染嚴重。調研為鄂西北地區豬Ⅱ型圓環病毒病的臨床診斷、治療和研究提供了基礎數據。
關鍵詞:鄂西北;豬圓環病毒;調查
中圖分類號:$858.28;$852.659.2 文獻標識碼:A 文章編號:1007-273X(2008)08-0008-02
斷奶仔豬多系統衰竭癥(Postweaning MuhisystemicWasting Syndrome,PMWS)是繼豬繁殖與呼吸綜合征(Porcine reoroductive and resoiratorv syndrome,PRRS)之后發現的感染豬的另一種主要傳染病。PCV-2是其重要的病因。1978年,德國學者Trischer首次從豬腎傳代細胞系PK-15中分離到該病毒,并于1982年將其命名為豬圓環病毒(PCV)。隨后,經血清學調查發現在德國、加拿大、新西蘭、英國、北愛爾蘭、美國等國的豬群中PCV抗體陽性率都很高。其中,1997年Clark從加拿大西部患有斷奶仔豬多系統衰竭綜合征(PMWS)的豬群中分離到一種新的病毒,該病毒與PK-15細胞中圓環病毒相似。并命名為PCV-2。此后。由PCV-2引起的各種疾病分布廣泛,給世界養豬業造成巨大的經濟損失,已受到國內外學者的高度重視。鄂西北地區還未見有關豬PCV-2相關的報道,為做好鄂西北地區由豬圓環病毒Ⅱ型引起的豬病的控制和治療,我們實習期間,對鄂西北地區47家豬場的豬圓環病毒Ⅱ型進行了血清學檢測,現將調研情況報告如下。
1 材料與方法
1.1 血樣的采集
(1)采集地點:襄樊、十堰、隨州、荊門等12縣市47個規?;i場。
(2)采集時間:2007年4月至2008年4月。
(3)血樣采集數量:母豬血樣61份,育肥豬血樣281份,共采集血樣342份。
(4)采集方法和血樣的處理。
隨機采取5mL前腔靜脈血樣,靜置1h,待血清析出后,2000r/min離心10min,取上層血清待檢。
1.2 儀器與試劑
(1)酶標儀。GF—M2000型酶標儀,山東高密彩虹分析儀器有限公司。
(2)德國eppendoff單道微量可調移液槍。
(3)37℃恒溫培養箱。
(4)豬圓環病毒抗體檢測試劑盒。來自深圳康百得生物有限公司生產的豬Ⅱ型圓環病毒抗體檢測ELISA試劑盒。

1.3 試驗原理與方法
(1)原理:本試劑盒采用重組圓環病毒Ⅱ型Cap蛋白作為固相抗原,用于檢測豬血清中抗圓環病毒Ⅱ型IgG抗體,從而間接診斷豬群圓環病毒感染情況。
(2)試驗方法:酶聯免疫吸附試驗法(ELISA)。
(3)操作步驟:①樣本稀釋:將樣本稀釋液按1:40比例稀釋。②加樣反應:將稀釋好的樣本液取lOOlxL注入已包被有圓環病毒Ⅱ型抗原的反應孔。37~C避光反應30rain后洗滌。③加酶反應:每孔加入酶標二抗100uL,37℃避光反應30min后洗滌。④顯色反應:加底物和顯色劑各501uL。37℃避光反應10min,加入終止液501xL,然后用酶標儀讀數。⑤詳細操作步驟按豬Ⅱ型圓環病毒病(ELISA)診斷試劑盒使用說明書操作。
(4)結果判斷:圓環病毒抗體的OD值≥0.150,表明豬只感染圓環病毒。
2 結果
送檢豬場47家,已知發病豬場25家,發病豬場占53.2%。血清342份,抗體陽性率80.4%,陰性率19.6%;待檢母豬血樣61份,抗體陽性率83.6%,陰性率16.4%;待檢肥豬血樣281份,抗體陽性率79.7%,陰性率20.3%。
將豬血清PCV-2抗體ELISA檢測結果與豬場豬只臨床診斷和病理解剖情況比較分析發現,血清抗體陽性豬只臨床和病理解剖的情況與有關文獻資料PCV-2感染報道的有關特征相吻合。綜上資料表明本地區有圓環病毒的存在,且感染情況嚴重。具體數據見表1。
3 討論
(1)送檢豬場47家,已知發病豬場25家,發病豬場占53.2%。血清342份,抗體陽性率80.4%,陰性率19.6%,表明鄂西北地區豬圓環病毒流行面廣,感染情況嚴重,希望引起有關部門重視,采取綜合防控措施。
(2)鑒于目前還沒有十分成熟的控制和消滅PCV-2感染的措施,所以對種豬場開展流行病學的調查,對血清陽性豬進行病原定性診斷,及時淘汰陽性豬,建立PCV陰性種豬場顯得十分必要。
(3)加強飼養管理,降低飼養密度,圈舍通風良好;減少環境應激;合理分群與混養;實行全進全出,避免將不同日齡的豬混群飼養,以此減少和降低豬群之間PCV-2及其他病原的接觸感染機會。
(4)建立完善的生物安全體系,將消毒衛生工作貫穿于養豬生產的各個環節,最大限度地降低豬場內污染的病原微生物,減少或杜絕豬群繼發感染的機率剛,尤其減少或杜絕藍耳病毒、細小病毒和支原體的感染。
(5)為防止圓環病毒和其他疾病的混合感染,要做好豬瘟、豬偽狂犬病、豬細小病毒病、豬氣喘病等疫苗的免疫接種工作,提高豬群整體的免疫水平,減少呼吸道病原體的繼發感染。增強肺臟對PCV-2的抵抗力。
(6)堅持自繁自養,加強飼養管理,及時清理糞污,消滅蚊蠅,并定期進行徹底消毒,引種時要做好檢疫工作,尤其是較大規模豬場,引種后應隔離2個月以上,無異常后方可混群。
致謝:本次調研工作得到襄樊正大公司譚華祥總經理和本院生物工程系王長義主任的大力支持。論文寫作得到熊江林和周華林二位老師的悉心指導和改稿。數據收集整理得到本院畜禽疾病診斷中心呂凡、韓宏樹、徐欣、李平、錢莎莎、劉科科、朱鈴、萬家樂等同學的幫助。市場調查得到襄樊正大動物保護中心技術部周傳奎、刑玉廣、楊緒波、孫中全、張欣、任濤同志的熱心幫助。在此一并表示衷心感謝!