豬基因工程復(fù)合干擾素對仔豬病毒性疾病防治效果觀察

摘要:以武漢市和江漢平原2個規(guī)模豬場發(fā)生豬瘟#65380;豬藍(lán)耳病等病毒性傳染病為對象，用豬基因工程復(fù)合干擾素配合常規(guī)藥物進(jìn)行了預(yù)防和治療效果試驗#65377;結(jié)果:干擾素配合常規(guī)獸藥治療總有效率分別為87.2%#65380;84.6%;與對照組總有效率29.1%#65380;26.1%相比較，差異極顯著(P<0.01);干擾素對病毒性疾病預(yù)防試驗仔豬成活率分別為95.8%#65380;93.6%，與對照組成活率54.7%#65380;68.1%相比較，差異極顯著(P<0.01)#65377;試驗表明，豬基因工程復(fù)合干擾素對規(guī)模豬場仔豬病毒性疾病防治效果良好#65377;

關(guān)鍵詞:豬基因工程復(fù)合干擾素;豬瘟;豬藍(lán)耳病

中圖分類號:S828;Q78;S859.79+7;S852.65文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A文章編號:1007-273X(2008)10-0010-02

近些年來，隨著種豬及產(chǎn)品流通頻繁和規(guī)模化豬場養(yǎng)殖密度增大，我國部分地區(qū)養(yǎng)豬場傳染性疾病的發(fā)生率與死亡率呈上升趨勢，尤其病毒性傳染病一旦侵入易感豬群，很快波及全群造成重大的經(jīng)濟(jì)損失#65377;2008年3月上旬，武漢市和江漢平原2個規(guī)模豬場仔豬斷奶前后突然發(fā)病，主要臨床癥狀為體溫升高至40.6~41.8℃，精神沉郁，食欲減退或廢絕，呼吸困難，皮膚發(fā)紅，病豬后肢無力，部分豬耳尖#65380;四肢末端#65380;腹下有塊狀紫斑#65377;病理變化主要為肺臟彌散性間質(zhì)性肺炎，扁桃體和淋巴結(jié)腫大出血，尤其是腹股溝淋巴結(jié)明顯腫大，腎臟密布針尖狀出血點，個別豬脾臟邊緣有梗死灶，少數(shù)豬胃腸道彌漫性出血，小腸細(xì)小如“雞腸”等#65377;先后用青#65380;鏈霉素#65380;先鋒霉素以及磺胺類藥物進(jìn)行防治均效果不佳，共發(fā)病960頭，死亡700頭，死亡率為72.9%#65377;采集發(fā)病仔豬血液和病變組織送實驗室診斷#65377;根據(jù)實驗室病原學(xué)和血清學(xué)檢測以及結(jié)合臨床癥狀和病理變化等確診武漢市某豬場豬發(fā)生以豬藍(lán)耳病和豬瘟為主的病毒性傳染病;江漢平原某豬場發(fā)生高致病性藍(lán)耳病#65380;普通藍(lán)耳病和圓環(huán)病毒病的混合感染#65377;經(jīng)采用豬基因工程復(fù)合干擾素配合抗生素等藥物進(jìn)行緊急治療和預(yù)防試驗，取得明顯試驗效果#65377;現(xiàn)將結(jié)果報道如下#65377;

1材料和方法

1.1材料

(1)試驗地點武漢市郊某規(guī)模豬場(簡稱A豬場，種豬規(guī)模612頭)，江漢平原某規(guī)模豬場(簡稱B豬場，種豬規(guī)模546頭)#65377;

(2)試驗藥品豬基因工程復(fù)合干擾素，中國科學(xué)院微生物研究所提供，規(guī)格:6mL/瓶;噻呋孢王(頭孢噻呋鈉)，批準(zhǔn)文號:獸藥字(2006)200312022，批號:080102，廣西北流市第二獸藥廠;抗病毒Ⅰ號(黃芪多糖注射液)，批準(zhǔn)文號:獸藥字(2006)180282711，批號:07101401，湖南泰豐動物藥業(yè)公司;氟力佳(氟苯尼考注射液)，批準(zhǔn)文號:獸藥字(2007)18027546，批號:20071006，湖南省亞牧動物藥業(yè)有限公司#65377;

(3)主要診斷試劑豬瘟抗原ELISA檢測試劑盒#65380;豬藍(lán)耳病ELISA試劑盒#65380;偽狂犬gI ELISA鑒別檢測試劑盒，美國IDEXX公司產(chǎn)品;豬圓環(huán)病毒ELISA抗體檢測試劑盒，武漢科前動物生物制品有限責(zé)任公司產(chǎn)品;Trizol及其他分子生物學(xué)試劑本實驗室自備#65377;

1.2方法

(1)診斷方法按照診斷說明書操作步驟和有關(guān)分子生物學(xué)實驗進(jìn)行#65377;同時將部分病樣送省動物疾病診斷中心進(jìn)行高致病性豬藍(lán)耳病檢測，根據(jù)檢測結(jié)果綜合判斷分析#65377;

(2)試驗設(shè)計試驗分為治療試驗和預(yù)防試驗#65377;治療試驗選擇臨床發(fā)病豬進(jìn)行療效觀察，A豬場選用196頭發(fā)病仔豬肌注噻呋孢王和黃芪多糖注射液，用量分別為40~50mg/kg體重和3~5mL/頭，連用3~5d，同時肌注豬基因工程復(fù)合干擾素2mL/頭，每天1次，連用3d;B豬場選用324頭發(fā)病仔豬肌注氟力佳和黃芪多糖注射液，用量分別為0.1mL/kg體重和3~5mL/頭，連用3~5d，同時肌注豬基因工程復(fù)合干擾素2mL/頭，每天1次，連用3d;A#65380;B兩豬場分別設(shè)對照組，對照組不注射豬干擾素，其他治療情況相同，記錄病豬死亡及康復(fù)情況#65377;預(yù)防試驗分別隨機(jī)選擇各豬場未發(fā)病哺乳仔豬，肌注豬干擾素3~4次，每7~8d預(yù)防注射1次，對照組不注射豬干擾素，統(tǒng)計發(fā)病及成活仔豬數(shù)，試驗組和對照組的免疫和保健均正常進(jìn)行#65377;

(3)效果判斷顯效∶體溫在用藥3d內(nèi)自然恢復(fù)至正常，1周內(nèi)臨床癥狀消失，食欲#65380;精神狀態(tài)恢復(fù)正常，4周內(nèi)不再復(fù)發(fā)#65377;有效∶1周內(nèi)體溫降至正常，臨床癥狀減輕，但仔豬體質(zhì)消瘦，皮毛粗亂，食欲不振，生長緩慢#65377;無效:用藥治療無好轉(zhuǎn)或加重，直至死亡或撲殺#65377;預(yù)防試驗仔豬的發(fā)病死亡數(shù)是在試驗后6周內(nèi)發(fā)病和死亡的仔豬數(shù)#65377;

2結(jié)果與分析

2.1診斷檢測結(jié)果

送檢樣品除進(jìn)行主要病毒抗原#65380;抗體檢測外，同時還進(jìn)行病原細(xì)菌的分離鑒定，未分離出臨床上有意義的致病菌株#65377;檢測結(jié)果見表1#65377;

根據(jù)實驗室檢測結(jié)果結(jié)合臨床癥狀和病理變化等確診為武漢市某豬場發(fā)生以豬藍(lán)耳病和豬瘟為主的病毒性傳染病，江漢平原某豬場發(fā)生高致病性豬藍(lán)耳病#65380;普通藍(lán)耳病和圓環(huán)病毒病的混合感染#65377;

2.2豬基因工程復(fù)合干擾素治療試驗結(jié)果

A豬場試驗組總有效率達(dá)87.2%，而對照組總有效率只有29.1%，兩者差異極顯著(P<0.01)#65377;試驗結(jié)果見表2#65377;

B豬場試驗組總有效率達(dá)84.6%，而對照組總有效率只有26.1%，兩者差異極顯著(P<0.01)#65377;試驗結(jié)果見表3#65377;

從A#65380;B兩豬場的治療結(jié)果表明，豬基因工程復(fù)合干擾素配合其他藥物對豬病毒性疾病的治療效果確實，發(fā)病初期立即進(jìn)行治療，絕大多數(shù)仔豬治療后1周內(nèi)康復(fù)，其中噻呋孢王+黃芪多糖注射液+干擾素組合治療效果與氟力佳+黃芪多糖注射液+干擾素組合療效無明顯差異#65377;

2.3豬基因工程復(fù)合干擾素預(yù)防試驗結(jié)果

A#65380;B兩豬場仔豬均在28日齡斷奶，A豬場仔豬多在斷奶前后發(fā)病，采用仔豬15日齡肌注干擾素2mL/頭，然后每隔7d預(yù)防注射1次，每次2mL/頭，連用4次#65377;B豬場仔豬多在斷奶后7~10d發(fā)病，采用仔豬21日齡肌注干擾素2mL/頭，然后每隔8d預(yù)防注射1次，每次2mL/頭，連用3次#65377;對照組除免疫和保健正常進(jìn)行外不注射干擾素#65377;同時A#65380;B兩豬場發(fā)生疫情后，加強(qiáng)了飼養(yǎng)管理和免疫隔離消毒工作，飼料中添加藥物以防止繼發(fā)感染#65377;結(jié)果A豬場試驗組仔豬成活率為95.8%，而對照組仔豬成活率為54.7%;B豬場試驗組仔豬成活率為93.6%，而對照組仔豬成活率為68.1%，差異極顯著(P<0.01)#65377;預(yù)防試驗結(jié)果見表4和表5#65377;

從A#65380;B兩豬場的預(yù)防試驗結(jié)果表明，在加強(qiáng)飼養(yǎng)管理和搞好獸醫(yī)衛(wèi)生防疫的基礎(chǔ)上，應(yīng)用豬基因工程復(fù)合干擾素進(jìn)行疫病的預(yù)防能明顯提高仔豬的成活率#65377;

3小結(jié)

干擾素(IFN)是人和動物細(xì)胞受到病毒感染等刺激后由巨噬細(xì)胞#65380;淋巴細(xì)胞及體細(xì)胞產(chǎn)生的一種具有高度生物活性的多功能糖蛋白，是由細(xì)胞基因組編碼產(chǎn)生的一種或多種小肽，具有廣譜抗病毒#65380;抗腫瘤和增強(qiáng)免疫等多種生物活性[1]#65377;本試驗采用中國科學(xué)院微生物研究所研制的高活性豬基因工程復(fù)合干擾素，是利用基因工程技術(shù)研制的復(fù)合干擾素蛋白制劑#65377;通過基因工程手段獲得的豬基因工程復(fù)合干擾素?zé)o論是含量或是活性，均高于機(jī)體受病毒或其他干擾素誘生劑刺激產(chǎn)生的干擾素#65377;通過本試驗表明豬基因工程復(fù)合干擾素配合其他藥物進(jìn)行豬病防治，能達(dá)到標(biāo)本兼治效果，對目前尚無特效藥物制劑防治豬病毒性疾病具有重要臨床意義#65377;

豬瘟(HC)是嚴(yán)重危害養(yǎng)豬業(yè)的一種主要疫病，我國部分地區(qū)時有豬瘟的發(fā)病報道[2，3]#65377;近年來，我國豬瘟的發(fā)病特點已發(fā)生了很大變化，即出現(xiàn)所謂非典型(溫和型)豬瘟，癥狀明顯減輕，死亡率降低，但是臨床上豬瘟常常與其他疾病混合或繼發(fā)感染，給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大損失#65377;另外由于國內(nèi)豬群中普遍存在豬藍(lán)耳病(PRRS)#65380;圓環(huán)病毒Ⅱ型(PCV-2)等免疫抑制性病毒感染，導(dǎo)致群體免疫力和健康水平下降，使豬群對多種疾病的易感性增高#65377;豬圓環(huán)病毒病目前尚無疫苗預(yù)防，只有采取綜合措施進(jìn)行防制;豬藍(lán)耳病雖有市場化疫苗，但是PRRSV具有易變性#65380;逃避免疫監(jiān)視#65380;間性感染#65380;自動清除以及抗體依賴性增強(qiáng)作用(ADE)等一系列生物學(xué)特點，給防控工作制造許多困難#65377;高致病性豬藍(lán)耳病(“高熱病”)造成我國養(yǎng)豬業(yè)損失慘重，目前疫情趨于平穩(wěn)，只有零星的暴發(fā)，但是危害性仍不容忽視#65377;總之，我國豬病異常復(fù)雜，混合或繼發(fā)感染已成常態(tài)，尤其是病毒性疾病的混合感染已成為豬傳染性疾病的主體，也是導(dǎo)致臨床豬病難治的主因#65377;因此，尋求一種高效#65380;安全以及無毒副作用的畜禽疾病防治新制劑，已成為許多人追求的目標(biāo)，干擾素作為一種廣譜抗病毒制劑，在獸醫(yī)臨床上用于豬病防治已得到了廣泛的證實[3~5]，本試驗也證實豬基因工程復(fù)合干擾素在獸醫(yī)臨床上不管是治療和預(yù)防豬病均有非常明顯效果#65377;基于目前我國養(yǎng)豬業(yè)現(xiàn)狀，在搞好豬場飼養(yǎng)管理和生物安全的前提下，在獸醫(yī)臨床上應(yīng)用豬基因工程復(fù)合干擾素制劑進(jìn)行豬病的防治，是一種較理想的經(jīng)濟(jì)適用方法#65377;豬基因工程復(fù)合干擾素對豬瘟和豬藍(lán)耳病的確切效果需經(jīng)進(jìn)一步進(jìn)行動物感染性試驗和抗病毒活性試驗來確定#65377;

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