4種薔薇科木本植物花浸提液的抑菌效果比較

徐寧偉,李方品,吳學謙,于秀敏,劉玉艷,高一梅

（1. 河北科技師范學院，河北 秦皇島066600；2. 河北農業大學，河北 保定071001；3. 騰沖市住房和城鄉建設局城市綠化管理所，云南 騰沖679100；4. 杭州植物園，浙江 杭州310013）

植物抑菌作用的研究目前主要集中在植物景觀、食品保鮮、醫療保健等領域[1-3]，如蒲公英、風毛菊分別可以用于醫療美容及植物源殺菌劑的開發[4，5]。許多園林植物具有抑菌作用，其抑菌效果因植物種類及配置類型的不同而存在一定差異[6]。有關植物花浸提液的抑菌效果還鮮有報道，本試驗選用河北科技師范學院校園內薔薇科4 種木本植物為材料，比較其花的浸提液的抑菌效果, 旨在為綠化樹種的合理配置提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試植物

供試植物為河北科技師范學院昌黎校區的4種薔薇科木本植物[7]，它們是毛櫻桃Cerasus tomentosa (Thunb.) Wall、粉花重瓣麥李Cerasus glandulosa (Thunb.) Lois. f. sinensis、貼梗海棠Chaenameles speciose (Sweet) Nakai、秋子梨Pyrus ussuriensis Maxim.(表1)。

1.1.2 供試菌種

供試菌種為河北科技師范學院農學與生物科技學院微生物實驗室提供的大腸桿菌（Escherichia coli）、枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）和金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）3 種具有代表性的空氣微生物。

表1 供試植物及其花特征

1.1.3 儀器與試劑

GZX-9240MBE 型電熱鼓風干燥箱、DNP-9082-1A 型電熱恒溫培養箱、PRX-450A 型智能人工氣候箱、YXQ-SG41-280 型手提式壓力蒸氣滅菌器、SW -CJ-1B(U)型單人單面凈化工作臺、752 型分光光度計、培養皿、涂布棒、接種環等。培養基為牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基，試劑有75%酒精、75%丙酮、蒸餾水等。

1.2 方法

1.2.1 菌種活化與菌懸液配制

將大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌分別接種在3 個牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基平板上，在恒溫培養箱37℃溫度下培養24 h[8]。用接種環分別挑取少量的3 種菌種分裝于盛有無菌生理鹽水的錐形瓶中，震蕩均勻，并做好標記。將標準菌液培養至OD600=0.3，并稀釋至105mL-1，即為供試菌懸液。

1.2.2 花的采集與浸提液制備

采集盛花期新鮮健康的花朵，去掉花柄，用蒸餾水沖洗2～3 次，晾干表面水分后剪碎，分別稱量20 g 于研缽研磨后倒入3 個100 mL 錐形瓶中，再分別倒入50 mL 的75%丙酮、75%酒精、蒸餾水，浸提并做好標記，將制備的浸提液放在紫外燈下進行滅菌0.5 h[9]后備用。

1.2.3 抑菌試驗

在經過紫外燈殺菌以及酒精擦拭過的超凈工作臺內進行，使用移液槍分別吸取0.1 mL 不同浸提液于培養基上，并用三角涂布棒均勻涂布，等待吸收后，再使用移液槍分別吸取0.1 mL 金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和枯草芽孢桿菌的菌懸液并涂布，設置3 個平行，一組對照，做好標記。放入恒溫培養箱，在37℃下培養24 h[8]。

1.2.4 數據記錄

記錄處理組及對照組菌落數量，如果菌落數量較少的，采用直接數取的方式；如果菌落密度大，則采用平板畫線法計數，即將平板平均分為8 個區域，選擇一個區域進行計數，最后總數乘以8 即可。通過記錄各培養皿處理組與對照組菌落數量，將所有菌落數據進行分類匯總，用Excel 制成表格，計算抑菌率。

抑菌率/%=[(對照菌落數-處理菌落數)/對照菌落數]×100%[8]

2 結果與分析

2.1 供試植物對大腸桿菌的抑制作用

4 種薔薇科木本植物花的不同浸提液對大腸桿菌生長的抑制作用見表2，除毛櫻桃花75%酒精浸提液外，其余浸提液均對大腸桿菌的生長有抑制作用，75%丙酮、75%酒精和蒸餾水3 種花浸提液對大腸桿菌生長的抑制作用最好的是粉花重瓣麥李，抑菌率分別為87.02%、91.43%和83.06%； 在每種植物3 種花浸提液對大腸桿菌生長的抑制效果，除毛櫻桃為蒸餾水浸提液最好外，其余3 種均為蒸餾水浸提液效果最差；綜合每種植物3 種浸提液抑菌效果，大小排序分別是粉花重瓣麥李＞秋子梨＞貼梗海棠>毛櫻桃。

表2 4 種薔薇科木本植物花的不同浸提液對大腸桿菌的抑制作用

2.2 供試植物對枯草芽孢桿菌的抑制作用

表3 顯示了4 種薔薇科木本植物花的不同浸提液對枯草芽孢桿菌的抑制作用，除粉花重瓣麥李花蒸餾水浸提液外，其余浸提液均對大腸桿菌的生長有抑制作用，75%丙酮、75%酒精和蒸餾水3 種花浸提液對枯草芽孢桿菌生長的抑制作用最好的是毛櫻桃，抑菌率分別為92.21%、92.91%和89.06%；在每種植物3 種花浸提液對枯草芽孢桿菌生長的抑制效果，均為蒸餾水浸提液的效果最差；綜合每種植物3 種浸提液對枯草芽孢桿菌的抑菌效果，大小排序分別是毛櫻桃>貼梗海棠＞秋子梨>粉花重瓣麥李。

表3 4 種薔薇科木本植物花的不同浸提液對枯草芽孢桿菌的抑制作用

2.3 供試植物對金黃色葡萄球菌的抑制作用

4 種薔薇科木本植物花的不同浸提液對金黃色葡萄球菌的抑制作用見表4，總體顯示抑菌效果很差，毛櫻桃、粉花重瓣麥李、貼梗海棠花的蒸餾水浸提液以及粉花重瓣麥李花的75%丙酮浸提液對金黃色葡萄球菌均無抑制作用，比較而言，毛櫻桃花75%酒精浸提液和貼梗海棠花75%丙酮浸提液對金黃色葡萄球菌的抑制作用較好，抑菌率分別為47.13%和32.70%，而秋子梨花的3 種浸提液雖然對金黃色葡萄球菌均有抑制作用，但抑菌率均低于20%。

3 結論

毛櫻桃、粉花重瓣麥李、貼梗海棠、秋子梨4 種薔薇科木本植物花的浸提液均對細菌有抑制作用，但同一種植物的不同浸提液以及同一種植物的同一浸提液對不同細菌的抑菌效應不同，不同植物的相同浸提液對同種細菌的抑菌效應也有所差異；不同植物不同浸提液的抑菌差異，是花的次生代謝產物成分差異、不同浸提方法浸提的次生代謝產物不同成分含量差異綜合作用的結果。

表4 4 種薔薇科木本植物花的不同浸提液對金黃色葡萄球菌的抑制作用

總體來看，粉花重瓣麥李對大腸桿菌的抑菌效果最好，毛櫻桃和貼梗海棠對枯草芽孢桿菌的抑菌效果最佳，毛櫻桃對金黃色葡萄球菌的抑菌效果較好。