黏蟲(chóng)體內(nèi)兩種微管蛋白基因ｃＤＮＡ序列的克隆與序列分析

樊　東　秦松柏　樸冬花　許艷麗

摘要以黏蟲(chóng)4齡幼蟲(chóng)為材料提取總RNA，利用RT—PCR和eDNA末端快速擴(kuò)增技術(shù)(RACE)，分別擴(kuò)增得到該蟲(chóng)的α和β微管蛋白基因的cDNA序列各1條。其中α微管蛋白基因的eDNA序列1443個(gè)堿基，包括一個(gè)1353個(gè)堿基的開(kāi)放閱讀框，編碼一個(gè)含450個(gè)氨基酸的蛋白，分子量約為50.0ku。氨基酸的142～148位存在一個(gè)微管蛋白標(biāo)志信號(hào)片段GGGTGSG，在氨基酸序列的C－端有一個(gè)酪氨酸殘基，N－端存在一個(gè)對(duì)轉(zhuǎn)錄后調(diào)控非常重要的保守區(qū)MRECI序列，以上特點(diǎn)與其他昆蟲(chóng)α微管蛋白氨基酸序列相同。黏蟲(chóng)β微管蛋白基因cDNA序列含1906個(gè)堿基，開(kāi)放讀碼框1 344個(gè)堿基，編碼氨基酸447個(gè)，分子量約為50.2ku，等電點(diǎn)4.75。1～4個(gè)氨基酸MREI為β微管蛋白轉(zhuǎn)錄后調(diào)控信號(hào)，140～146GGGTGSG位同樣存在一個(gè)微管蛋白標(biāo)志信號(hào)片段。序列比對(duì)表明，克隆的α和β微管蛋白基因與其他昆蟲(chóng)的a和p微管蛋白基因在核苷酸和氨基酸水平上都是高度同源的，黏蟲(chóng)與家蠶(Bombyx morti)α微管蛋白的氨基酸序列同源性達(dá)到99.3％，與其他3種夜蛾科昆蟲(chóng)α微管蛋白的氨基酸序列同源性更是達(dá)到100％。黏蟲(chóng)與家蠶β微管蛋白的氨基酸序列同源性達(dá)到98.7％，與煙草天蛾p微管蛋白的氨基酸序列同源性達(dá)到99.6％。兩個(gè)基因的cDNA序列已經(jīng)登錄GenBank并獲得登錄號(hào)分別為EUlOOOl6和EU234504。

關(guān)鍵詞黏蟲(chóng)；α微管蛋白；β微管蛋白；克隆；序列分析

中圖分類號(hào)Q 785，S 433.4

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