沙冬青莖甲醇提取物對小菜蛾幼蟲生長發育抑制作用研究

雷雪靜　賀達漢　何玉玲　馬永林

摘要：室內測定了沙冬青莖甲醇提取物對小菜蛾幼蟲生長發育的抑制作用。研究結果表明，其提取物對小菜蛾幼蟲相對生長率(RGR)、近似消化率(AD)、食物利用率(ECI)和食物轉化率(ECD)雖在一段時間內連續發生變化，但最高濃度為0.2 g／mL時，這4項指標始終低于其他處理。沙冬青莖甲醇提取物對小菜蛾幼蟲歷期的影響不明顯，但使蛹期延長，幼蟲死亡率升高，且提取物濃度越高，這些作用效果越明顯。

關鍵詞：沙冬青莖甲醇提取物；小菜蛾；抑制作用

中圖分類號：S 482．39

沙冬青[Ammopiptanthus mongolicus(Max-im.ex Kom.)Cheng f.]系豆科旱生植物，屬于第3紀亞熱帶常綠闊葉林旱生化類型的殘遺種，是溫帶荒漠地區唯一的常綠闊葉灌木Ⅲ。該植物味苦微辛，性溫有毒，綿羊、山羊偶有啃食則呈醉狀，采食過多可致死。據有關資料記載該植物綜合利用價值較高，除固沙、綠化觀賞等功能外，其葉和嫩莖可殺蟲，被列入可開發利用植物資源。那么該植物體內的有毒物質對昆蟲是否也具有毒殺、驅避、生長發育抑制作用，作者研究沙冬青一年內生長的嫩莖的殺蟲活性對綜合開發利用該植物及植物源農藥開發提供初步依據。

小菜蛾[Plutella zylostella(L.)]屬鱗翅目菜蛾科，是一種全球性的十字花科蔬菜害蟲。因其分布廣，易于飼養，所以常作為試蟲。利用植物次生物質調節害蟲行為從而控制作物蟲害的研究，特別是從植物或植物產品中提取和分離控制害蟲的生物活性物質已成為害蟲防治的一個世界性的趨勢。

1材料與方法

1.1供試材料

于2006年10月采集沙冬青嫩莖，洗凈、陰干后粉碎并過60目篩。每次各稱取50 g粉，用濾紙包好，將濾紙包置于索氏提取器的樣品管中，先用甲醇浸泡5 h，然后再于75℃下連續提取24 h，用旋轉蒸發儀將提取液濃縮至浸膏。浸膏置于4℃冰箱中冷藏保存。

供試的小菜蛾采自未施任何農藥的甘藍田中，然后在室內用新鮮、無農藥的油菜及甘藍飼養。選取第2代后的2齡中期幼蟲供試。

1.2生長發育抑制作用的測定

參照楊振德等飼喂稱重法測定。將新鮮甘藍葉片用打孔器打成直徑為2 cm的圓形葉碟。稱取沙冬青莖甲醇提取物2 g，加入1 mL無水乙醇攪拌溶解(可加熱至45～50℃，溶解效果會更好)，待完全溶解后加入蒸餾水依次稀釋成0.2、0.1、0.05 g／mL3個濃度溶液。將3種濃度的提取液分別涂抹在葉碟兩面，各處理40片葉碟。另設對照，對照葉碟在10％的乙醇溶液中浸泡8 s后取出晾干，同樣浸泡40片葉碟。將處理好的葉碟放人直徑為6 cm的培養皿(墊有保濕濾紙)中，每皿2片葉碟(已稱重)作為一個重復，接人饑餓4 h的2齡中期幼蟲(已稱重)，每皿1頭，重復20次。用保鮮膜封口，昆蟲針扎孔透氣，向培養皿內注入0.5 mL，蒸餾水保濕。然后將培養皿放入光照周期L∥D=14 h∥10 h、溫度20℃的光照培養箱中培養。24 h后對幼蟲、葉碟再次稱重；48 h后對幼蟲、葉碟、糞便稱重并更換新鮮甘藍葉片(需稱重)。以后每天稱取幼蟲、葉片、糞便重量，并每隔1天更換新鮮葉片，直至幼蟲化蛹，觀察記錄幼蟲期、蛹期所需時間(d)，計算化蛹率、羽化率。

1.3數據計算與分析

根據楊振德等方法計算相對生長率(RGR)、近似消化率(AD)、食物利用率(ECI)、食物轉化率(ECD)等。

利用DPS V3.01專業統計軟件分析數據方差，數據之間的差異用Duncans新復極差法進行比較。

2結果與分析

2.1沙冬青莖甲醇提取物對小菜蛾幼蟲生長發育的抑制作用

用不同濃度提取物藥液處理過的葉碟飼喂小菜蛾2齡中期幼蟲2 d，然后更換未處理過的新鮮甘藍葉片繼續飼喂。各處理幼蟲的體重增加量、取食量均有一定的變化，體現在RGR、AD、ECI、ECD 4項指標的變化中(圖1)。

從各項指標的變化明顯看出，幼蟲取食處理葉片后的3 d內，幼蟲在0.20 g／mL下的相對生長率、近似消化率、食物利用率、食物轉化率始終低于其他2個處理值；低濃度下(0.05 g／mL)4項指標值始終低于對照值，即濃度越高，幼蟲體重增加量越小，對食物的利用能力越小。尤其是幼蟲取食處理葉片1 d后，可能由于對環境的不適應，各處理下的幼蟲相對生長率都發生下降。但CK、0.1 g／mL、0.05g／mL濃度下的變化急劇，0.2g／mL濃度變化非常小。幼蟲取食處理葉片2 d后，可能由于適應了培養箱內環境，幼蟲取食能力、消化力開始逐漸恢復，所以幼蟲相對生長率均開始上升，但0.2 g／mL處理下幼蟲相對生長率的變化仍最小，而且在整個取食處理葉片后的4 d內生長變化極其平緩。從圖1可看出幼蟲在高濃度下生長率低而且變化緩慢與高濃度下低的食物消化能力、食物轉化、利用能力有密切的關系。

2.2沙冬青莖甲醇提取物對小菜蛾發育歷期、化蛹率及羽化率、死亡率的影響

沙冬青莖甲醇提取物不同濃度對小菜蛾2齡中期幼蟲發育至蛹的歷期影響不是很大，最大濃度0.2 g／mL與CK處理下幼蟲歷期差異不顯著，相差不到1 d，但0.2 g／mL處理下的小菜蛾蛹期比其他處理明顯延長，而且化蛹率和羽化率明顯降低，即濃度越高，幼蟲的死亡率越高，0.2 g／mL時幼蟲死亡率已達到75％。

3討論與結語

沙冬青莖甲醇提取物對小菜蛾幼蟲具有生長發育抑制作用。其不同濃度下的幼蟲生長變化體現在不同濃度下的RGR的變化。高濃度時RGR明顯比低濃度及對照低。

高濃度下幼蟲生長緩慢與低的食物消化能力、吸收能力、轉化能力有密切關系。這一點從食物近似消化率(AD)、食物利用率(ECI)、食物轉化率(ECD)的連續變化中看出。處理葉碟飼喂后的幼蟲體重增加緩慢，高濃度下幼蟲體重增加量明顯低于低濃度及對照下的幼蟲體重增加量，幼蟲生長遲緩，而且死亡率較高。最高濃度下的幼蟲死亡率達到了75％，而對照僅有30％。提取物濃度越高，幼蟲死亡率也越高。即使飼喂新鮮無處理葉片，幼蟲死亡率仍比對照明顯增加。這一結果與蔡霞等測定水葫蘆乙醇提取物對小菜蛾生長發育抑制作用結果相似，表明提取物同時存在瞬時效應和滯后效應，這在害蟲防治上應受到重視。所以，做提取物對小菜蛾幼蟲生長發育影響作用試驗時，提取物濃度應比其他作用如拒食、胃毒、觸殺時低，這樣才能保證飼養過程中幼蟲數量不至于太少，而影響測定數據的準確性。

沙冬青莖甲醇提取物雖對小菜蛾具有生長發育抑制作用，但具體是哪種或哪幾種成分起作用，以哪種方式起作用還需進一步研究。