摘要:研制經濟方便的新型乙肝植物口服疫苗是全球控制乙型肝炎的現實要求。研制乙肝植物口服疫苗遇到的一個主要的困難是HBsAg基因在受體植物中的表達量低。香蕉是植物口服疫苗理想的受體。因此,以香蕉為受體,進一步提高HBsAg基因表達量的研究非常必要。從pBIL2載體上克隆了香蕉果實特異表達的BanLec啟動子,并引入了Gubd Ⅲ、BamH Ⅰ酶切位點;利用EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ雙酶切YEPFLAG-HBS獲得了HBsAg基因;通過BamHⅠ酶切位點,利用T4DNA連接酶連接了BanLec啟動子和HBsAg基因,形成BanLec-HBsAg連接片段;再把該片段通過EcoR Ⅰ、HindⅢ酶切位點插入pCAMBIA2300植物表達載體,成功構建香蕉果實特異表達啟動子驅動下的乙肝表面抗原基因表達載體。
關鍵詞:香蕉;果實特異表達啟動子;乙肝表面抗原;表達載體;構建
中圖分類號:S668.4 文獻標識碼:A 文章編號:1009-9980(2008)05-691-04