芥菜類蔬菜對蕪菁花葉病毒病抗病性材料的鑒定及篩選

摘要：通過田間自然發(fā)病鑒定和苗期人工接種蕪菁花葉病毒(Turnip Mosaic Virus.TuMV)鑒定，篩選榨菜和雪菜種質(zhì)資源中的抗病性材料。對367份材料田間自然發(fā)病鑒定，篩選出對蕪菁花葉病毒病表現(xiàn)為免疫的材料20份，表現(xiàn)為高抗的材料30份，表現(xiàn)為抗病的材料29份。對96份自交3代以上材料進行苗期人工接種鑒定，篩選出11份抗病毒病材料，其中品種編號為06191和06222的1份榨菜材料對病毒病表現(xiàn)高抗，病情指數(shù)分別為3.13和3.57。06222田間鑒定和苗期接種鑒定均表現(xiàn)為高抗。芥菜抗源材料的篩選為抗病育種工作奠定了基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞：榨菜；雪菜：TuMV；病毒病：鑒定

榨菜和雪菜是具有寧波地方恃色的芥菜類蔬菜。寧波是中國雪菜之鄉(xiāng)，雪菜獲原產(chǎn)地保護，寧波市榨菜種植面積1.33萬hm²，雪菜0.67萬hm²。榨菜和雪菜是本市腌制蔬菜的主要原料之一。隨著榨菜和雪菜精加工技術(shù)水平的不斷提高，其栽培面積將進一步擴大，生產(chǎn)和加工前景良好。病毒病是芥菜類蔬菜較難治愈的毀滅性病害，已成為芥菜生產(chǎn)的首要制約因素。研究表明芥菜病毒病的主導(dǎo)病源是蕪菁花葉病毒(Turnip Mosaic Virus，TuMV)，蚜蟲是主要傳播媒介。不同的芥菜品種對病毒病的抗性不一，了解品種的抗病性，對現(xiàn)有品種的利用、抗源材料的篩選和抗病品種的選育都具有重要的意義。筆者在廣泛收集芥菜種質(zhì)資源的基礎(chǔ)上，對蕪菁花葉病毒病抗病性材料進行了篩選，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

田間自然發(fā)病抗病性鑒定材料共367份，其中榨菜285份。雪菜82份。苗期人工接種抗病性鑒定供試材料為96份自交3代以上的榨菜和雪菜材料，其中榨菜69份，雪菜27份。TuMV毒源由浙江大學(xué)分析測試中心提供。

1.2 試驗方法

1.2.1 田間自然發(fā)病抗病性鑒定 2006年9月28日將367份供試材料播種于寧波市高新技術(shù)實驗園區(qū)內(nèi)，10月26日定植大田。雪菜株行距0.35m×0.45 m，榨菜株行距0.20m×0.25m，每份材料32株。分別在定植后30d、收獲前進行病毒病病害調(diào)查。

1.2.2 苗期人工接種抗病性鑒定 供試材料于2007年4月2日在寧波市高新技術(shù)實驗園區(qū)的防蟲網(wǎng)室中直播，每品種30株。幼苗4～5片真葉期接種，將感染TuMV的病葉按鮮葉重1:1.5加1％K₂HPO₄和Na₂SO₃，的混合液研成勻漿，再通過紗布過濾到試管中，試管放在冰水中備用。接種葉面噴撒600目金剛砂粉，用手指蘸接種液在葉面上輕輕摩擦接種，以接種清水為對照。接種4～5d后，觀察癥狀的發(fā)展，每半月調(diào)查1次病情，至病情穩(wěn)定為止。

1.2ｖ3 病情調(diào)查分級標(biāo)準(zhǔn) 按下列標(biāo)準(zhǔn)對病情進行分極。

0級：植株生長正常，不發(fā)病。

1級：植株有少量病葉，出現(xiàn)明脈、皺縮或花葉、感病葉片數(shù)占全株葉片數(shù)的1/3以下，對產(chǎn)量的影響不明顯。

2級：植株病葉較多，約占全株葉片總數(shù)的1/3～1/2，病葉皺縮，花葉明顯，植株生長受阻。達(dá)到了影響產(chǎn)量的程度。

3級：植株病葉較多，約占全株葉片總數(shù)的1/2以上。病葉皺縮、花葉、扭曲顯著，植株生長嚴(yán)重受阻、矮縮，顯著影響產(chǎn)量。

4級：全株顯現(xiàn)癥狀。無1片健康葉片，葉片皺縮、褪綠、嚴(yán)重畸形，植株嚴(yán)重矮縮。產(chǎn)量受到嚴(yán)重影響，甚至毫無收成。

1.2.4 病情程度劃分標(biāo)準(zhǔn) 對每份材料計算病情指數(shù)。材料對病毒病的抗性級別劃分為6類。免疫(I)：病情指數(shù)為0；高抗(HR)：0＜病情指數(shù)≤5.5；抗病(R)：5.5＜病情指數(shù)≤11.1；耐病(T)：11.1＜病情指數(shù)≤33.3；感病(S)：33.3＜病情指數(shù)≤55.6；高感(HS)：55.6<病情指數(shù)≤100。

2 結(jié)果與分析

2.1 田間自然發(fā)病抗病性鑒定

從表1田間鑒定調(diào)查結(jié)果可見，在鑒定的367份材料中，對病毒病表現(xiàn)為免疫的材料有20份，表現(xiàn)為高抗的材料有30份，表現(xiàn)為抗病的材料有29份。田間表現(xiàn)抗病及以上的79份材料中榨菜有30份，雪菜49份。田間表現(xiàn)以耐病和感病為主，榨菜比雪菜更易感染病毒病。田間調(diào)查自然發(fā)病情況，雪菜材料病毒病發(fā)病率為53.27％。病情指數(shù)為16.41，抗性級別為T。榨菜材料病毒病發(fā)病率為61.11％，病情指數(shù)34.48，抗性級別為S。

2.2 苗期人工接種抗病性鑒定

苗期人工接種鑒定調(diào)查結(jié)果表明，96份材料中未發(fā)現(xiàn)免疫材料，抗性級別以耐病為主。編號06191和06222的2份榨菜對病毒病表現(xiàn)高抗，病情指數(shù)分別為3.13和3.57。編號06114、06118、06121、06199、06216、06220、06224的7份榨菜和編號06-1、06-24的2份雪菜表現(xiàn)抗病毒病。其中06222田間鑒定和苗期接種鑒定均表現(xiàn)為高抗。29份材料苗期接種鑒定結(jié)果與田間自然發(fā)病調(diào)查結(jié)果一致。其余材料鑒定結(jié)果與田間自然發(fā)病調(diào)查結(jié)果有差異甚至截然不同。如06189和06219田間鑒定分別表現(xiàn)為免疫和高抗，苗期接種鑒定表現(xiàn)為耐病；06114田間表現(xiàn)為感病，而接種鑒定表現(xiàn)為抗病；0688田間鑒定表現(xiàn)高抗，苗期鑒定表現(xiàn)為高感。

3 討論與結(jié)論

國內(nèi)外研究表明，在現(xiàn)有種質(zhì)資源中篩選TuMV抗源，是一條快速、有效培育抗病毒病品種的途徑。本試驗結(jié)果表明，芥菜類蔬菜品種間對TuMV抗性差異顯著，同時，發(fā)現(xiàn)品種內(nèi)個體間抗病性存在差異。這為抗源材料的篩選提供了可能，曹壽椿等究發(fā)現(xiàn)，采用系譜選擇有利于抗病微效基因的定向累加，一般而言，經(jīng)3～5代系譜選擇，雖然選擇效應(yīng)隨品種和世代而異，但終可篩選出高抗或抗TuMV的抗源。本試驗通過苗期人工接種TuMV抗病性鑒定篩選出了9份抗病毒病榨菜和2份抗病毒病雪菜，但由于苗期接種強度大，發(fā)病條件好，一般發(fā)病較重，難免淘汰了一些抗性較好的品種。因此，有必要對抗病或耐病型品種進行重復(fù)鑒定，并結(jié)合田間成株期鑒定和系譜選擇，有望篩選出一些抗性良好的材料或提高材料的抗病性。在今后的工作中還需進一步搜集更豐富的品種資源，在廣泛的遺傳背景下進行大量的篩選，為抗病育種工作打下牢固的基礎(chǔ)。