ｐ５３基因與結(jié)直腸癌關(guān)系的研究進(jìn)展

【關(guān)鍵詞】 p53基因；結(jié)直腸癌；基因突變

文章編號：1003-1383(2008)06-0733-04中圖分

類號：R 735.3..+5 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

結(jié)直腸癌是我國常見的惡性腫瘤，近幾十年以來隨著人民生活水平的提高和社會(huì)結(jié)構(gòu)老齡化傾向，其發(fā)病率有增高趨勢，死亡率較高。結(jié)直腸癌侵襲轉(zhuǎn)移的發(fā)生是導(dǎo)致患者死亡的主要原因，嚴(yán)重危害人類健康。多年來為了探討其發(fā)病機(jī)制、早期診斷和有效的治療方法，人們進(jìn)行了大量的研究工作，取得了一定的進(jìn)展。但其發(fā)病原因尚未完全清楚。目前較普遍接受的觀點(diǎn)是：結(jié)直腸癌變的產(chǎn)生是由于癌基因和抑癌基因的協(xié)同作用所導(dǎo)致的，正常的結(jié)直腸黏膜最初由上皮增生發(fā)展成為良性腫瘤，然后惡變成為腺癌Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級，再發(fā)展成為轉(zhuǎn)移癌。p53基因是一種抑癌基因，已有眾多的臨床實(shí)驗(yàn)證實(shí)p53基因的突變與一些腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)，并且已經(jīng)證實(shí)p53基因突變與p53蛋白的過度表達(dá)呈良好的相關(guān)性。因此p53基因成為目前研究惡性腫瘤浸潤和轉(zhuǎn)移的熱點(diǎn)，筆者就p53基因和結(jié)直腸癌關(guān)系的研究進(jìn)展做一綜述。

p53基因的結(jié)構(gòu)和定位

人類p53基因是位于染色體17p13.1，全長16~20 kb，含有11個(gè)外顯子和10個(gè)內(nèi)含子，編碼393個(gè)氨基酸，相對分子質(zhì)量53 000的核磷酸化蛋白。Wt-p53蛋白可分為三部分。第一部分為含轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域和生長抑制結(jié)構(gòu)域，定位于1-95Aa的酸性氨基末端，此區(qū)也是p53與Mdm-2、p14ARF和p300結(jié)合的區(qū)域。第二個(gè)部分是能與特異性識別的DNA序列結(jié)合的102-292Aa的中央核心區(qū)，p53的5個(gè)保守序列（BoxI-V）有4個(gè)位于此區(qū)，這4個(gè)保守序列是此區(qū)功能執(zhí)行的重要結(jié)構(gòu)。對存在p53基因突變的腫瘤進(jìn)一步檢測發(fā)現(xiàn)，97%的p53基因突變集中于中央核心區(qū)，其中75%以上為錯(cuò)義突變^［1］，突變改變了p53基因的立體結(jié)構(gòu)或影響其與DNA的結(jié)合而使p53基因功能喪失。第三部分為300-393Aa的堿性羧基末端，含四聚體寡聚化結(jié)構(gòu)域、非特異DNA結(jié)合區(qū)域及3個(gè)核定位信號和1個(gè)核輸出信號。核寫位信號介導(dǎo)p53蛋白定位于胞核內(nèi)，核輸出信號則具有介導(dǎo)p53蛋白從胞核穿梭入胞質(zhì)的功能。

目前研究將p53基因分為野生型（wt p53）和突變型（mt p53）^［2］。正常細(xì)胞中的p53基因是無突變的野生型p53（wt p53）基因，具有腫瘤生長抑制功能^［3］。因wt p53基因含量很少，平均5 000分子/細(xì)胞，并且半衰期僅為20分鐘左右，難以通過常規(guī)免疫組化檢測到；而突變型p53基因由于其構(gòu)象改變且能與一些癌蛋白結(jié)合形成復(fù)合物；其穩(wěn)定性增加，半衰期延長，可達(dá)2～12小時(shí)，細(xì)胞內(nèi)聚集量比正常細(xì)胞高出100～1000倍左右。因此，可用免疫組化方法檢測出來。一般認(rèn)為它可基本反應(yīng)p53基因的突變。

p53基因的功能

1.p53基因與細(xì)胞周期調(diào)控 細(xì)胞周期（cell cycle）是從上次有絲分裂結(jié)束開始到下一個(gè)有絲分裂結(jié)束為止，周而復(fù)始的生長過程，并呈現(xiàn)一定的周期性。完整的細(xì)胞周期包括DNA合成前期（G₁期）、DNA合成期（S期）、DNA合成后期（G₂期）和有絲分裂期（M期），休眠期的細(xì)胞（G₀期）已經(jīng)退出細(xì)胞周期，但在一定的刺激因素作用下可以重新進(jìn)入周期進(jìn)行有絲分裂，是腫瘤復(fù)發(fā)的根源。調(diào)節(jié)細(xì)胞周期進(jìn)展的是專一的細(xì)胞周期調(diào)控點(diǎn)，細(xì)胞周期有3個(gè)調(diào)控點(diǎn)，分別調(diào)控G₀/G₁、G₁/S、G₂/M^［4］。在DNA受損傷后，原核生物和真核生物細(xì)胞分裂均延遲，在細(xì)胞周期中，從G₁/S、G₂/M演進(jìn)的延遲會(huì)在大多數(shù)機(jī)體發(fā)生。其中G₁期關(guān)卡的存在可防止用損傷的DNA作為模板進(jìn)行DNA復(fù)制，允許損傷的DNA在關(guān)鍵的細(xì)胞功能發(fā)生之前修復(fù)，可增加細(xì)胞存活時(shí)間，限制帶有可遺傳的基因損傷的細(xì)胞增殖^［5］。 p53蛋白具有進(jìn)化保守性，可在DNA復(fù)制水平上調(diào)節(jié)細(xì)胞的正常生長，是細(xì)胞生長的重要的負(fù)調(diào)節(jié)因子^［6］。p53蛋白對于細(xì)胞周期的作用是間接的，主要是促進(jìn)p21基因的轉(zhuǎn)錄，增加p21蛋白的合成發(fā)揮作用。p21蛋白幾乎能與所有的cy-clins3/CDKs復(fù)合物結(jié)合，抑制cyclins-CDKs激酶復(fù)合物的活性，使細(xì)胞不能通過G₁期，因此細(xì)胞無法合成DNA。但也有認(rèn)為p53蛋白可直接與DNA復(fù)制機(jī)制中的成分如單鏈結(jié)合蛋白增殖細(xì)胞核抗原相互作用抑制DNA復(fù)制，阻止細(xì)胞分裂，使之出現(xiàn)G₁期阻滯。

2.p53基因與細(xì)胞凋亡 細(xì)胞凋亡（cell apoptosis）又稱細(xì)胞程序性死亡（programmed cell death），是機(jī)體內(nèi)細(xì)胞自然死亡的一種生理現(xiàn)象。它與壞死有區(qū)別，在形態(tài)學(xué)上主要表現(xiàn)為染色質(zhì)沉淀，細(xì)胞體積縮小，DNA在核小體間斷裂或碎片，形成凋亡小體可迅速被周圍的吞噬細(xì)胞吞噬。有報(bào)道用野生型p53基因及突變的p53基因轉(zhuǎn)染骨肉瘤細(xì)胞株，再將轉(zhuǎn)染細(xì)胞靜脈注射給裸鼠。4個(gè)月后，兩種轉(zhuǎn)染細(xì)胞在肺產(chǎn)生了數(shù)目相近的轉(zhuǎn)移瘤，但野生型p53基因轉(zhuǎn)染而產(chǎn)生的轉(zhuǎn)移瘤主要由骨基質(zhì)及凋亡細(xì)胞組成，說明野生型p53基因與細(xì)胞凋亡有關(guān)^［7］。Crighton等^［8］研究證實(shí)， p53基因通過一種依賴

DRAM的放射誘導(dǎo)細(xì)胞自我吞噬，并且只有DRAM過表達(dá)時(shí)才會(huì)導(dǎo)

致最小限度的細(xì)胞凋亡，說明DRAM是p53介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡的關(guān)鍵因子。Sanding等^［9］用腺病毒轉(zhuǎn)染p53基因和p16基因在腫瘤體外培養(yǎng)細(xì)胞系中，觀察到p53基因過度表達(dá)引起腫瘤細(xì)胞凋亡。Pan等^［10］研究證明，在老鼠的胚胎干細(xì)胞中，在腫瘤抑制中起關(guān)鍵作用的p53基因關(guān)閉了胚胎干細(xì)胞自我更新所必需的基因Nanog，導(dǎo)致胚胎干細(xì)胞的分化，關(guān)閉細(xì)胞自我更新。

p53基因突變與結(jié)直腸癌的發(fā)生

1.結(jié)直腸癌的發(fā)病機(jī)制

結(jié)直腸癌按其發(fā)病類型可分為散發(fā)性和遺傳性兩種。散發(fā)性結(jié)直腸癌大約占結(jié)直腸癌的70%，既沒有家庭性背景，也沒有遺傳傾向，多發(fā)生于50歲以上，可能與飲食、環(huán)境等因素有關(guān)。遺傳性結(jié)直腸癌主要表現(xiàn)為遺傳綜合征，這類患者有結(jié)直腸癌的遺傳傾向和家庭聚集性。其遺傳綜合征包括：以結(jié)腸息肉為主要表現(xiàn)，如家庭性腺瘤性息肉病（familial adenomatous polyposis，F(xiàn)AP）和錯(cuò)構(gòu)瘤息肉綜合征；不以息肉為主要表現(xiàn)，如遺傳性非息肉性結(jié)直腸癌（hereditay nonpolyposis colorectal cancer，HNPCC）及癌家族綜合征。目前認(rèn)為結(jié)直腸癌發(fā)生遵循兩條途徑：染色體不穩(wěn)定途徑和錯(cuò)配修復(fù)途徑。

①染色體不穩(wěn)定途徑。染色體不穩(wěn)定途徑提出很早，它遵循“正常黏膜-腺瘤-腺癌”的組織發(fā)生順序。在此途徑中染色體的不穩(wěn)定所導(dǎo)致的癌基因的激活突變和抑癌基因的失活突變（雜合性丟失）引起結(jié)直腸癌。以抑癌基因的失活更為重要。APC基因突變是限速步驟，也是最早的步驟。此途徑還涉及了p53基因、DCC基因及K-Ras基因等，主要涉及的是抑癌基因和癌基因。家庭性腺瘤性息肉病（APC基因突變）和大部分散發(fā)性結(jié)直腸癌是由此途徑發(fā)生的。p53基因在晚期腺瘤轉(zhuǎn)變?yōu)榘┑倪^程中起關(guān)鍵作用。

②錯(cuò)配修復(fù)途徑。錯(cuò)配修復(fù)途徑的研究開始于1993年。一些研究發(fā)現(xiàn)HNPCC患者很少存在p53基因、DCC基因、K-Ras基因及APC基因的突變，同時(shí)又發(fā)現(xiàn)HNPCC患者存在著微衛(wèi)星不穩(wěn)定。最近研究表明，是由于錯(cuò)配修復(fù)系統(tǒng)功能障礙導(dǎo)致的微衛(wèi)星不穩(wěn)定。HNPCC患者和15%~20%的散發(fā)性結(jié)直腸癌存在微衛(wèi)星不穩(wěn)定，但兩者機(jī)制不同。HNPCC遵循“腺瘤-腺癌”的組織發(fā)生順序，但癌變率高，癌變時(shí)間短。早期形態(tài)改變?yōu)楫惓ｋ[窩病灶（ACF）。微衛(wèi)星不穩(wěn)定陽性的散發(fā)性結(jié)直腸癌并不遵循傳統(tǒng)的“腺瘤-腺癌”的組織發(fā)生順序，是由鋸齒狀腺瘤發(fā)展而來^［11］。兩者的發(fā)生機(jī)制也不相同。HNPCC是由錯(cuò)配修復(fù)基因突變引起的，而微衛(wèi)星不穩(wěn)定陽性的散發(fā)性結(jié)直腸癌很少發(fā)生錯(cuò)配修復(fù)基因突變，而是由hMLH1基因啟動(dòng)子的甲基化所導(dǎo)致的hMLH1基因的沉默表達(dá)引起的。

2.p53基因突變 結(jié)直腸癌的發(fā)生與其他疾病的發(fā)生一樣，受遺傳、環(huán)境、社會(huì)、行為習(xí)慣等各方面影響，然而已有眾多的臨床實(shí)驗(yàn)證實(shí)p53的突變與一些腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)，尤其結(jié)腸癌。并且已經(jīng)證實(shí)p53突變與p53蛋白過度表達(dá)呈良好的相關(guān)性^［12］。

結(jié)直腸癌發(fā)生時(shí)p53的突變和表達(dá)：正常胃腸黏膜均為陰性表達(dá)。有實(shí)驗(yàn)表明^［13］，分化良好的腺瘤，包括家庭性多發(fā)性結(jié)腸息肉這一常染色體顯性遺傳病以及結(jié)直腸息肉中p53的表達(dá)明顯低于結(jié)直腸癌，這一結(jié)果支持p53基因突變在結(jié)直腸癌的發(fā)生中起重要作用的論點(diǎn)。另外，EL-DeiryWS等^［14］研究表明野生型p53能夠誘導(dǎo)p21表達(dá)。引起多種腫瘤細(xì)胞的生長抑制，而突變p53則無此作用，同樣，徐文懷等研究表明p53與p21在結(jié)直腸癌中的表達(dá)無直接相關(guān)性。通常在結(jié)直腸癌的發(fā)生過程中，可經(jīng)歷如下幾個(gè)階段：正常黏膜、腺瘤、結(jié)直腸癌、轉(zhuǎn)移病灶。眾多的實(shí)驗(yàn)表明正常黏膜p53表達(dá)為陰性，然而有研究表明腺瘤階段p53基因就有可能發(fā)生突變，并且未隨腫瘤的發(fā)生發(fā)展而進(jìn)一步增高。結(jié)直腸癌發(fā)生過程中p53基因突變率在比較高的水平，大約50%～80%之間，且主要發(fā)生在第5～8外顯子上，并且有研究表明p53基因突變與腺瘤及腺癌的組織學(xué)類型無關(guān)。因此，檢測p53表達(dá)狀況有利于預(yù)測腺瘤癌變傾向、p53基因蛋白產(chǎn)物的檢測已成為結(jié)直腸癌早期診斷的重要手段之一。

p53基因與結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移及預(yù)后

結(jié)直腸癌的預(yù)后除了與分期、分化程度、治療方法等因素有關(guān)外。同時(shí)眾多原癌基因的激活和腫瘤抑制基因的突變和（或）失活都起重要作用。對于p53基因與結(jié)直腸癌預(yù)后的關(guān)系各文獻(xiàn)報(bào)道不一致。國外資料報(bào)道p53蛋白細(xì)胞核高表達(dá)狀態(tài)，可作為結(jié)直腸癌患者預(yù)后的重要生物學(xué)標(biāo)記。Okubo等^［15］檢查了110例結(jié)直腸癌患者，發(fā)現(xiàn)p53過度表達(dá)和變異均與生存相關(guān)。而且在遠(yuǎn)端結(jié)直腸癌的危險(xiǎn)性更高，同時(shí)p53表達(dá)對遠(yuǎn)、近側(cè)結(jié)直腸癌預(yù)后判斷的作用是有差異的。沈嵐等^［16］研究結(jié)直腸癌p53表達(dá)與淋巴結(jié)中心增生（GH）關(guān)系中發(fā)現(xiàn)p53強(qiáng)陽性表達(dá)組GH增生減弱，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率高，預(yù)后差。Goh等^［17］報(bào)道187例結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移組p53基因突變率為70%，而無轉(zhuǎn)移組為43%。認(rèn)為p53基因突變與結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移潛能有關(guān)。Yamagnchi等^［18］報(bào)道p53表達(dá)與結(jié)直腸癌的肝轉(zhuǎn)移有關(guān)。在Dukes’c期中p53陽性患者5年生存率低于p53陰性組。因而認(rèn)為這可能與p53陽性者有較高的增殖活性有關(guān)。

而有些學(xué)者則認(rèn)為p53是否表達(dá)與結(jié)直腸癌預(yù)后無關(guān)。鄒揚(yáng)等^［19］對307例結(jié)直腸癌標(biāo)本進(jìn)行檢測p53陽性表達(dá)57.98%，隨訪219例病人6～30個(gè)月，在p53表達(dá)陽性的腫瘤復(fù)發(fā)率為17.24%，p53表達(dá)陰性者復(fù)發(fā)率為15.56%，兩者比較差異無顯著性（P＞0.05）。劉小方等^［20］研究亦表明p53基因突變與患者性別、腫瘤大體類型、組織學(xué)分類、細(xì)胞分化、病理分期等均無明顯關(guān)系。鄧海軍等^［21］采用PCR-SSCP和免疫組織化學(xué)方法，檢測68例直腸癌遠(yuǎn)側(cè)癌旁黏膜p53基因突變及p53蛋白表達(dá)情況，結(jié)果26.47%直腸癌遠(yuǎn)側(cè)癌旁黏膜存在p53基因突變，23.53%直腸癌遠(yuǎn)側(cè)癌旁黏膜存在p53蛋白表達(dá)，而直腸癌遠(yuǎn)側(cè)癌旁黏膜p53基因突變及其蛋白表達(dá)與直腸癌臨床病理學(xué)特征無相關(guān)性。Gallego等^［22］檢測了126例術(shù)后5年的患者，發(fā)現(xiàn)p53過度表達(dá)與預(yù)后無關(guān)，與臨床病理上的變化不同，無論單因素分析還是多因素分析，p53表達(dá)與局部控制、無病生存或全組生存率在統(tǒng)計(jì)學(xué)上無顯著相關(guān)（P值分別為0.91、0.18、0.17）。

惡性腫瘤預(yù)后與淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移有密切的聯(lián)系，結(jié)直腸癌也不例外。但是對于p53基因在結(jié)直腸癌發(fā)生淋巴道轉(zhuǎn)移過程中是否起作用，觀點(diǎn)亦不一致。Hayashi等^［23］分析了120例結(jié)直腸癌區(qū)域淋巴結(jié)的p53基因的突變情況及預(yù)后，術(shù)后隨診觀察中有40%～70%的p53陽性患者發(fā)生局部復(fù)發(fā)和區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，而p53陰性患者無一發(fā)生復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移。李強(qiáng)等^［24］的研究表明p53的過度表達(dá)與大腸癌的分化程度、浸潤深度、腫瘤直徑無關(guān)（P＞0.05），僅與其淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)（P＜0.05）。Manguila等^［25］則認(rèn)為p53表達(dá)與淋巴轉(zhuǎn)移無關(guān)。鄧昊等^［26］用免疫組化法（D0-07）檢查結(jié)直腸癌標(biāo)本74例，經(jīng)溶脂法檢查淋巴結(jié)共3503枚，全組中31例有p53過度表達(dá)，認(rèn)為p53過度表達(dá)與結(jié)直腸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、微轉(zhuǎn)移程度無明顯相關(guān)性。

p53基因治療結(jié)直腸癌

由于p53基因突變率高，恢復(fù)腫瘤細(xì)胞中的野生型p53（wt p53）的功能成為p53抑癌基因治療的首要途徑。大量體外培養(yǎng)細(xì)胞和動(dòng)物模型都證實(shí)了外源的wt p53導(dǎo)入后，腫瘤細(xì)胞增殖減慢，細(xì)胞發(fā)生凋亡，瘤體體積縮小，對放、化療藥物的敏感性增高。Okimoto等^［27］經(jīng)肝動(dòng)脈給RCN-9結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移大鼠注入腺病毒介導(dǎo)的p53基因，48 h后，順鉑（3 mg/kg）被注入大鼠腹膜腔，一段時(shí)間后，發(fā)現(xiàn)肝轉(zhuǎn)移癌細(xì)胞廣泛死亡，而肝功能沒有一點(diǎn)損害。Cook等^［28］發(fā)現(xiàn)，氧化亞氮能夠促進(jìn)p53依賴性細(xì)胞凋亡。通過轉(zhuǎn)移一氧化氮合酶基因到結(jié)腸癌細(xì)胞內(nèi)，誘導(dǎo)一氧化氮生成，使得p53基因15位絲氨酸磷酸化增加，從而激活p53基因，顯著抑制腫瘤生長。目前結(jié)直腸癌基因治療已經(jīng)從基礎(chǔ)理論階段進(jìn)入臨床試驗(yàn)，而選擇安全有效的轉(zhuǎn)移載體是關(guān)鍵。目前國內(nèi)外研究最多，發(fā)展最快的是以腺病毒和脂質(zhì)體為載體。用重組腺病毒介導(dǎo)的p53基因治療腫瘤，能夠誘導(dǎo)腫瘤內(nèi)部野生型p53基因，從而抑制腫瘤細(xì)胞增殖。利用p53基因治療腫瘤臨床試驗(yàn)已經(jīng)開展，初步結(jié)果已經(jīng)證明直接瘤內(nèi)注射這類載體的安全性，并且證實(shí)即使在機(jī)體內(nèi)出現(xiàn)抗腺病毒免疫反應(yīng)時(shí)p53基因也能夠表達(dá)。Ⅰ期臨床試驗(yàn)已經(jīng)評估了經(jīng)肝動(dòng)脈一次性給予腺病毒介導(dǎo)的p53基因治療結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移的安全性和有效性。最大劑量達(dá)到2.5×10¹²病毒顆粒時(shí)患者仍然可以耐受，副作用是患者出現(xiàn)類似流行性感冒的癥狀。16例患者中4例出現(xiàn)一過性的轉(zhuǎn)氨酶升高^［29］。

綜上所述，影響結(jié)直腸癌預(yù)后的因素是復(fù)雜的，p53基因突變或高表達(dá)也許只是其中的一個(gè)方面，況且p53基因突變又是突變位點(diǎn)多、范圍廣，p53基因?qū)Y(jié)直腸癌淋巴道轉(zhuǎn)移及預(yù)后的價(jià)值目前尚有爭議，有關(guān)p53基因?qū)τ诮Y(jié)直腸癌預(yù)后的影響有待更深入的研究。

參考文獻(xiàn)

［1］Kato S，Han SY，Liu W，et al.Understanding the function-structure and function-mutation relationships of p53 tumor suppressor protein by high-resolution missense mutation analysis［J］.PNAS，2003，100:8424-8429.

［2］張常華，何裕隆，詹文華，等.多發(fā)性結(jié)腸癌中抑癌基因p53的表達(dá)與突變［J］.中華實(shí)驗(yàn)外科雜志，2005，3(22):305-306.

［3］王用金，楊建峰，湯魯霞，等.結(jié)直腸癌cerbB-2， p53;CEA 的表達(dá)及臨床治療的指導(dǎo)意義［J］.臨床醫(yī)學(xué)，2005，25（5）：44-45.

［4］楊云霞，包定元.細(xì)胞周期與腫瘤基因治療［J］.四川生理科學(xué)雜志，2003，25(3):117-119.

［5］ HanS，Guo CC，Liu H，et al.Expression and significance of Idl helix-loop-helix prote in overexpression in castric eancer［J］.Cancer lett，2004，216:632-637.

［6］陳志紅，錢海鑫，馬 圭，等.p53在結(jié)直腸癌中的表達(dá)及其臨床意義［J］.江蘇大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2004，14(1):44-46.

［7］Van Dyke T.p53 and tumor suppression［J］.N Eegl J Med，2007，356(1):79-81.

［8］Crighton D， Wilkinson S，Ryan KM，et al.DRAM linksautophagy to p53 andprogrammedcelldeath［J］.Autophagy， 2007，3(1):72-74.

［9］SandingBV，BrandK，Herwig S，etal.p16 and p53 genes transferredwiththe help of adenovirustoindnceapoptictumor cell deathes［J］.UgeskrLaeger，1997，159(46):6825-6830.

［10］PanG，ThomsonJA，Koide H，etal.Nanog and transcriptional networksin embryonic stem cell pluripotency［J］.CellRes，2007，17(1):42-49.

［11］Haydon AMM，Jass JR. Emerging pathways in colorectal cancer development［J］.Lancet Oncol， 2002，3(2):83-88.

［12］陳小賀，孟文格，孟繁杰，等.大腸癌組織中CyclinD I 和p16及Rb的表達(dá)及其臨床意義［J］.中華腫瘤防治雜志，2006，13(1):38-41.

［13］薄挽瀾，胡鳳麗，翟 博，等.cerbB-2bcl-2和p53在結(jié)直腸腫瘤中的表達(dá)及其臨床意義［J］ 胃腸病學(xué)，2007，12（5）：279-282.

［14］El-Deiry WS，Tokino T，Velculeseu VE，et al.WAF1 a potential madiator of p53 tumor suppression［J］.Cell， 1993，75:817-825.

［15］Okubo R，Masuda H，Nemoto N. p53 mutation found to be a significant prognostic indication in distal colorectal cancer［J］.Cancer Oncol Rep， 2001 May-Jun，8(3):509-514.

［16］沈 崗，郭 潔，楊詠梅，等.結(jié)腸癌組織中p53、 p14基因表達(dá)的研究［J］.中國內(nèi)鏡雜志，2003，9（10）：34-36.

［17］Goh HS，Chan CS，Kihine K，et al.p53 and behavior of colorectal cancer［J］.Lanet，1994，344:233.

［18］Yamaguchi A，Nukagawara G，Kurosaka Y，et al.p53 inmunoreaction in endoscopic biopsy specimens of colorectal cancer and its prognosticsignicance［J］.Br J Cancer，1993，68:399-402.

［19］鄒 揚(yáng)，蘇震爾，狄建忠，等. p53蛋白陽性表達(dá)與結(jié)直腸癌的臨床分期及預(yù)后評估［J］.外科理論與實(shí)踐，2003，8(2):155-156.

［20］劉小方，張 浩，孔凡民，等. p53基因突變與大腸癌預(yù)后的關(guān)系［J］.中華消化雜志，2005，25(9)：559-560.

［21］鄧海軍，李國新，卿三華，等. 直腸癌遠(yuǎn)側(cè)癌旁粘膜p53基因突變及其蛋白表達(dá)［J］.實(shí)用癌癥雜志，2003，18（2）:170-172.

［22］Gallego MG，Acenero MJ，Ortega S，et al.Prognostic influence of p53 nuclear overexpression in colorectal carcinoma［J］.Dis Colon Rectum， 2000 Jul，43(7):971-975.

［23］Hayashi N， Ito I，Yanagisawa A，et al.Genetic diagnosis of lymph-node metastasis in colorectal cancer［J］.Lancet，1995，345:1257-1259.

［24］李 強(qiáng)，秦華東.鄒朝霞，等.PTTG與p53在大腸癌組織中的表達(dá)［J］.哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，42（1）:50-52.

［25］Manguila Flavien，徐文懷，王智勇，等. 大腸癌p53和p21，WAF1/CIP1蛋白表達(dá)及其意義［J］.北京大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2001，33(6):582-584.

［26］鄧 昊，鄧 羚，陳 瑩，等. p53過度表達(dá)與結(jié)直腸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、微轉(zhuǎn)移關(guān)系的研究［J］.腫瘤防治研究，2003，30(6):486-488.

［27］Okimoto T，Yahata H，Itou H，et al.Safety and growth suppressive effect of intra-hepatic arterial injection of AdCMV- p53 combined with CDDP to rat liver metastatic tumons［J］.J Exp Clin Cancer Res，2003，22(3):399-406.

［28］Cook T，Wang Z，Alber S， et al.Nitric oxide ionizing radiation synergistically promote apoptosis and growth inhibition of cancer by activating p53［J］.Cancer Res，2004，64(21):8015-8021.

［29］Palmer DH，Chen MJ，Kerr KJ.Taking Gene Therapy into the Clinic［J］.Biomed Biotechnol， 2003，2003(1):71-77.

(收稿日期：2008-07-14 修回日期：2008-11-24)

(編輯：梁明佩)