關于復方丹參片的質量分析

　　摘要：臨床常用藥物復方丹參片生產廠家眾多，有效成分的含量差異較大，需進行質量分析，考核使用，以確保療效。
　　關鍵詞：復方丹參片；質量考核
　　
　　復方丹參片為臨床常用藥物，生產廠家眾多。由于在藥典2000版之前，均未制定含量測定方法，因此對市售的復方丹參片的內在質量進行考核是有必要的。目前，國內文獻報道的控制本品含量的監控成分有總丹參酮、丹參酮BA、原兒茶醛等，在藥典2000版中，本品含量控制的是丹參酮ⅡA，而與本品處方一致，功能與主治一致的復方丹參滴丸，含量控制的是丹參素。本文對北京市藥學會提供的三個廠家四個品種上市藥品主成分丹參中的丹參酮I、丹參酮ⅡA、丹參素、原兒茶醛含量分別進行了考核。
　　
　　一、使用的儀器設備和試劑
　　
　　使用的儀器設備有：儀器HPll00高效液相色譜儀，G1311A四元泵，G1322A在線脫氣體，G1313A自動進樣器，G1316A柱溫箱，G1314A可變波長檢測器，HPCHEM色譜工作站，TCQ250超聲波清洗器（北京醫療設備二廠）。使用的試劑有：化學對照品丹參酮I、丹參酮ⅡA、原兒茶醛（中國藥品生物制品機檢定所）、丹參素（天津天土力制藥集團有限公司提供），甲醇、乙氰為色譜試劑，其余試劑均未分析純。
　　
　　二、方法與結果
　　
　　（一）色譜條件
　　1、丹參酮I、丹參酮ⅡA：色譜柱：HypersilODS柱(250×4．0mm，5μm)；流動相：甲醇：水；流速：1．5ml／min；檢測波長：270nm；柱溫：40℃。在此條件下丹參素、原兒茶醛完全分離，且峰型穩定。2、丹參素、原兒茶醛；色譜柱Hypersit ODS柱（250×4．0mm，5μm）：流動相：甲醇：乙氰：1％冰醋酸（含0．04％IPRB7試劑）為10；2：88；流速；1．0m1／min；檢測波長：280nm；柱溫：40℃。在此條件下丹參素、原兒茶醛完全分離，且峰型穩定。
　　（二）標準曲線制備
　　1、丹參酮I、丹參酮ⅡA標準曲線。分別取丹參酮I和丹參酮ⅡA對照品質量，精密稱取，加甲醇適量，超聲15min使溶解，再加甲醇制成濃度為每1m1含丹參酮I和丹參酮ⅡA各80μg的對照品溶液I。精密吸取對照品溶液I加甲醇稀釋，制成每1mI含丹參酮I和丹參酮ⅡA10，20，30，40，50，60μg的標準品，置自動樣器，自動進樣10μl，進行色譜分析，以峰面積y對進樣濃度C（μg／m1）回歸，求得回歸方程，線性關系良好。
　　2、丹參素和原兒茶醛標準曲線。分別取丹參素鈉和原兒茶醛對照品適量，精密稱取，加甲醇溶解并稀釋制成濃度為每1ml含丹參素和原兒茶醛分別為140μg和48μg的對照品溶液B。精密吸取對照品溶液H加甲醇稀釋，制成濃度分別為丹參素7，14，28，56，112，140μg／m1，原兒茶醛為2．4，4．8，9．6，19．2，38．4，48．0μg／mI的標準品，置自動樣器，自動進樣10μl，進行色譜分析，以峰面積y對進樣濃度C（μg/mI）回歸，求得回歸方程，線性關系良好。
　　（三）供試品制備及測定
　　1、取供試品10片，除去糖衣或薄膜衣，精密稱定，研細，取18，精密稱定，置于50m1容量瓶中，加入甲醇25mI，超聲處理15min，放冷，濾過，取續濾液，即得．按1）項條件，自動進樣10μl，測定丹參酮I和丹參酮ⅡA。
　　2、取供試品10片，除去糖衣或薄膜衣，精密稱定，研細，取0．5g，精密稱定，置于50ml容量瓶中，加入甲醇適量，超聲處理1h，放冷，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，即得。自動進樣10μl，測定丹參素和原兒茶醛。
　　（四）精密度試驗
　　1、丹參酮Ⅰ、丹參酮ⅡA。取一供試片劑按1項制備供試品，置自動進樣器中并依法重復進樣6次，結果丹參酮I、丹參酮ⅡA含量的RSD分別為：1，66％（n＝6）和1．25％（n＝6）。
　　2、丹參素、原兒茶醛。取一供試片劑按2項制備供試品，置自動進樣器中并依法重復進樣6次結果丹參素和原兒茶醛含量的RSD分別為：1．19％（n＝6）和2．31％（n＝6）。
　　（五）回收率試驗
　　1、丹參酮I、丹參酮ⅡA。取含量測定后的四個供試片劑溶液適量，分別加入對照液I適量，得四個供試品，進樣測定丹參酮I和丹參酮ⅡA，計算加樣回收率。
　　2、丹參素和原兒茶醛。取含量測定后的一個供試片劑溶液適量，三份，分別加入對照液Ⅱ適量得三個供試品，進樣測定丹參素和原兒茶醛，計算加樣回收率。
　　
　　三、討論
　　
　　1、別取對照品溶液、供試品溶液、流動相、丹參滴丸供試液（按藥典處理），依法處理，置自動進樣器，進樣記錄色譜圖，以水溶性成分為主的復方丹參滴丸無丹參酮I和丹參酮ⅡA陽性峰，復方丹參片和復方丹參滴丸一樣有丹參素和原兒茶醛陽性峰，由色譜圖可知本試驗條件，樣品中的丹參酮I和丹參酮ⅡA、丹參素和原兒茶醛與其他組分分離完全。理論塔板數以丹參酮ⅡA和丹參素計算分別為11220和6947。
　　2、本品的主藥丹參的有效成分為脂溶性的二萜醌類和水溶性的酚酸類成分，均具有心血管方面的藥理作用，近年來研究表明水溶性成分丹參素的擴張心腦血管，抗血小板聚集，清除氧自由基等作用較二萜醌類的丹參酮更強，且水溶性成分是抗心肌缺血的主要成分。在藥典2000版中，處方、功能與主治一致的復方丹參滴丸控制的成分為丹參素，因此，本試驗同時考察了脂溶性的丹參酮I、丹參酮ⅡA和水溶性的丹參素和原兒茶醛。
　　3、對供試品四種成分的含量分別進行單因素方差分析，結果顯示：四種樣品的丹參酮I、丹參酮ⅡA、丹參素的含量有非常顯著性的差異（P＜0．01），原兒茶醛的含量無顯著性差異（P＞0．05），且丹參酮ⅡA的含量均未達到藥典2000版規定（不得少于0．20mg/片），低的僅為36．4％，高的為82．80％，相差較多。復方制劑中各有效成分的含量差異較大，將會影響臨床療效。因此，應該加強中藥復方制劑的質控方法研究。
　　（作者單位：郝秀艷，哈藥集團世一堂制藥廠；張春靜，哈藥集團中藥三廠）