栗屬植物ｃｐＳＳＲ標記技術的建立與體系優化

摘 要：葉綠體微衛星標記是一種新的分子標記技術。用1對來源于擬南芥的cpSSR引物研究栗屬資源，對栗屬植物cpSSR反應體系的主要影響因子進行了優化篩選。結果表明，20 μL反應體系各組分的最適濃度分別為：2.5mmol／LMg²⁺，0.5 u Taq DNA聚合酶，0.25 mmol／L dNTP，10 mg／L的DNA模板，正向引物和反向引物都為0.1 μmol／L，NTCP40最適退火溫度為56 ℃。該體系已成功應用于栗屬資源的遺傳多樣性研究中。

關鍵字：栗屬植物；cpSSR；體系優化

中圖分類號：S664．2 文獻標識碼：A 文章編號：1009-9980(2007)04-557-04

現代分子生物學技術的迅速發展，為在DNA水平上研究板栗種質遺傳多樣性提供了有效的技術手段，同時為栗屬植物起源和分類研究提供了新的思路。cpSSR(Chloroplast simple Sequence Repeat，葉綠體簡單序列重復)標記技術，是在SSR標記技術基礎上發展起來的新的DNA分子標記技術。它具有SSR標記的優點又兼顧到葉綠體基因組的特點，被廣泛應用于植物群體遺傳分析及系統發育分析的研究中。但由于其引物來源受限，高等木本被子植物中的應用僅在獼猴桃閣、柑橘類和歐洲栗等果樹中有報道。未見有cpSSR標記用于其它栗屬資源的研究報道。本實驗對各個因子的最佳反應條件進行了摸索，建立了適合于板栗等栗屬植物的cpSSR反應體系。

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