貴州省稻瘟病菌對稻瘟靈的抗藥性研究

袁　潔　楊學輝　何海永　金　星

摘要采用生長速率法測定了采自貴州省26個縣(市)不同年份稻瘟病標樣175個稻瘟病菌單孢菌株對稻瘟靈的抗藥性。結果表明，貴州省主要稻區都有抗稻瘟靈菌株出現，但大部分抗性菌株的抗藥性表現為低抗水平。黔東南、貴陽、遵義地區抗性菌株頻率明顯高于其他幾個地區，其抗性菌株頻率分別為10．86％、10．29％和8．00％。

關鍵詞植物保護學；稻瘟病菌；稻瘟靈；抗藥性

中圖分類號紀80年代中國引進稻瘟靈(富士一號，isoprothio－lane；)以來，由于其高效、內吸特性使之成為全國稻區防治稻瘟病的主要藥劑。但是，經過20多年的廣泛使用，稻瘟病菌田間抗性日益嚴重。根據袁潔等的研究，貴州省稻瘟病菌對稻瘟靈敏感性已下降。為了明確貴州不同稻區稻瘟病菌抗藥性菌株的抗性水平和分布情況以及稻瘟靈在生產上繼續使用前景，從2001年開始進行貴州省水稻主產區稻瘟病菌對稻瘟靈的抗藥性研究。

1材料和方法

1．1供試菌株和藥劑

2001—2004年在貴州省8個地區26個縣(市)100多個品種上采集穗頸瘟病標樣200余份。通過單孢分離，獲得400多個單孢菌株，選擇其中175個有效單孢分離菌進行抗藥性測定，其中包括貴陽地區23株，遵義地區23株，黔東南州49株，畢節地區23株，黔南州14株，黔西南州26株，六盤水地區14株，銅仁地區3株。

40％稻瘟靈乳油(富士一號)，日本農藥株式會社生產，浙江海寧化丁實業有限公司分裝。

1．2測定方法

將供試藥劑配成一定濃度的稀釋液，各取1mL藥液至直徑9 cm的培養皿中，再加入9mL酵母淀粉培養基，混勻后制成遞度為4、5、6．67、10、20、40ug／mL。的含藥平板。

將預培養7d的稻瘟病菌菌落制成直徑為5mm的菌碟，挑取菌碟置于含藥平板中央，28℃恒溫培養，以不含藥平板為空白對照，8d后測量各處理的菌落直徑，計算藥劑對菌絲生長的抑制百分率。

1．3數據統計分析

通過各處理濃度的對數(x)和菌絲生長抑制率的幾率值(y)進行回歸分析，計算出稻瘟靈對各參試菌株的抑制中濃度EC,o值，根據病菌的敏感性頻率分布建立稻瘟病菌對稻瘟靈的敏感基線，確定抗性水平和抗性菌株頻率。

抗性水平＝供試菌株ECso／敏感基線。抗性水平≤1為敏感菌株；1<抗性水平≤3為低抗菌株；3<抗性水平≤lo為中抗菌株；抗性水平>10為高抗菌株。根據抗性水平將參試菌株劃分為敏感性菌株和抗性菌株。再根據抗性菌株在群體中的出現頻率計算出抗性菌株頻率。抗性菌株頻率＝抗性菌株／供試菌株X100％。

2結果與分析

2．1不同地區稻瘟病菌對稻瘟靈的敏感性

從表l知，不同地區的稻瘟病菌群體對稻瘟靈的敏感性有一定差異，其中遵義地區菌株的敏感性最差，平均EC為9．27ug／mL，其次是貴陽地區(8．39"8／mI。)、六盤水地區(7．32ug／mL)、黔東南州(EC＝6．85 ug／mL)、黔南州(EC＝6．66ug／mL)、黔西南州(EC＝6．23ug／mL)、畢節地區(ECso＝6．02 PZ／mL)、銅仁地區(EC＝4．47ug／mL)。

2．2敏感基線的建立

采用生長速率法測得2001—2003年的146株稻瘟病菌對稻瘟靈的敏感性呈連續性分布(圖1)，EC值最小為1．33ug／mL最大為24．58ug／mL，相差18．48倍。不同敏感性的頻率分布呈不規則的正態分布(圖2)，說明其中一部分菌株已表現抗藥性。求得左側正態分布峰的平均EC＝6．8027--5．7947ug／mL(P＝0．05)，根據野生敏感型病原群體對藥劑敏感性為正態分布的原理，本研究將6．8027ug／mI。定為稻瘟病菌對稻瘟靈的敏感基線。

2．2抗藥性測定及抗性評價

利用本研究建立的敏感基線對2001—2004年貴州省不同地區的175個稻瘟病菌株進行抗藥性測定，結果表明(表2)，8個地區從田間均分離到了抗性菌株，抗性菌株頻率分別為黔東南lo．86％、貴陽10．29％、遵義8．00％、畢節5．7l％、黔西南5．14％、黔南4．57％、六盤水3．43％和銅仁o．57％。大部分菌株的抗性水平集中在l一3倍，個別菌株抗性水平達到3倍以上。從表2看出，最高抗性水平和抗性菌株頻率出現較高的地區主要在黔東南、貴陽和遵義，最高抗性水

平分別為：遵義3．61、黔東南2．87和貴陽2．13；抗性菌株頻率分別為：遵義8．co％、黔東南10．S6％、貴陽10．29％。這一結果與貴州省稻瘟病的發生和防治基本吻合，因為這3個地區的水稻生產和病害防治水平都相對較高。

3討論

彭云良等測定稻瘟病菌對稻瘟靈的抗性是以15ug／mL濃度下病菌生長抑制率小于或大于57．26％來確定抗性或敏感菌株的。本研究表明，146個菌株中對稻瘟靈最敏感菌株的EC僅為1．33ug／mL而且4ug／mL濃度下對稻瘟病菌的生長抑制率達到75％以上。146個菌株對稻瘟靈的敏感性分布呈連續性，病菌群體敏感性頻率分布呈、祁之秋等‘建立病原菌對正態分布，平均EC。為(6．802 7i5.794 7)ug／mL(P＝0．05)。參考周明國殺菌劑敏感性墓線的方法和原理，將6．8027ug／mL定為敏感基線，比較符合貴州省田間稻瘟病菌群體對稻瘟靈的實際抗性水平，該基線的建立可作為今后田間抗藥性監測的依據。

利用本研究制定的敏感基線對貴州省主要稻區175個稻瘟病菌株的抗藥性測定結果表明，貴州省8個地區都有抗稻瘟靈菌株出現，但其抗性水平主要集中在低抗水平。因此，只要加強田間抗藥性監測，注意與其他農藥的交替和輪換使用，稻瘟靈在貴州稻區仍可作為防治稻瘟病的有效藥劑使用。