[摘要]目的:利用a—平滑肌肌動(dòng)蛋白(a—SMA)基因,重組反義和正義逆轉(zhuǎn)錄病毒載體,評(píng)價(jià)a—SMA逆轉(zhuǎn)錄病毒對(duì)NIU3T3細(xì)胞和血管平滑肌的影響。方法:用含全長(zhǎng)a—平滑肌肌動(dòng)蛋白(a—SHA)cDNA的質(zhì)粒DNA的酶切、連接,重組反義和正義 a—SMA的目的cDNA,構(gòu)建逆轉(zhuǎn)錄病毒載體,并感染培養(yǎng)的NIU3T3細(xì)胞與平滑肌細(xì)胞,進(jìn)行細(xì)胞形態(tài)學(xué)和基因表達(dá)的觀察。結(jié)果:反義和正義重組逆轉(zhuǎn)錄病毒能夠攜帶的目的基因并成功整合到NIH3T3細(xì)胞基因組中;利用兩種逆轉(zhuǎn)錄病毒分別感染NIH3T3、血管平滑肌細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)和形態(tài)有一定的影響,反義重組逆轉(zhuǎn)錄病毒使細(xì)胞活性下睜、基因表達(dá)減弱,而正義重組逆轉(zhuǎn)錄病毒使細(xì)胞活性下降、基因表達(dá)增強(qiáng)明顯。結(jié)論:a-SMA重組病毒對(duì)細(xì)胞的形態(tài)、突起的生長(zhǎng)甚至細(xì)胞的生存均有影響。
[關(guān)鍵詞]逆轉(zhuǎn)錄病毒;轉(zhuǎn)染;a—平滑肌肌動(dòng)蛋白;基因
[中圖分類號(hào)]Q786 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A [文章編號(hào)]1008—6455(2005)04—0399—03