升麻萃取物對大鼠離體腸肌運動的影響研究*

張建英，左愛學(xué)，劉羿晨

（云南中醫(yī)學(xué)院，云南 昆明 650500）

升麻萃取物對大鼠離體腸肌運動的影響研究*

張建英，左愛學(xué)，劉羿晨

（云南中醫(yī)學(xué)院，云南 昆明 650500）

目的 探索升麻提取物對SD大鼠小腸動力影響的有效部位。方法 采用SD大鼠小腸平滑肌離體試驗，觀察升麻水提取物及其氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取物對平滑肌收縮波形的影響。結(jié)果 升麻水提物和氯仿萃取部分對試驗大鼠離體小腸平滑肌有顯著降低基線和幅值的作用，給藥前后差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05)。結(jié)論 升麻水提物具有抑制小腸運動的作用，其主要有效成分存在于氯仿萃取部分。

升麻；離體腸肌；小腸動力

升麻為毛茛科升麻屬植物升麻 Cimicifuga foetida.的根莖[1]，具有發(fā)表、透疹、解毒的功效，臨床用于治療中氣下陷[2-3]、久瀉久痢、脫肛、婦女崩、帶，子宮下墜等癥[4]。本研究旨在探索升麻對小腸動力的影響及其作用的有效部位，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

動物：SD大鼠8只，雌性，體重約200 g，由昆明醫(yī)科大學(xué)提供，生產(chǎn)許可證號為SCXK（滇）2011-0004。

試劑與藥品：氯化鈉，無水氯化鈣，氯化鉀，氯化鎂，碳酸氫鈉，磷酸二氫鈉，葡萄糖，均為分析純，用于配制臺氏液（Tyrode）。升麻（產(chǎn)地四川，批號20130404），每1 kg升麻分別用8，8，6 kg純凈水煎煮3次，去渣后加熱濃縮至1 g／mL生藥濃度，制得升麻水提液。根據(jù)需要配制相應(yīng)質(zhì)量濃度。取質(zhì)量濃度為1 g／mL的升麻水提液3 000 mL，依次用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取，分別回收溶劑得氯仿萃取物A 17.9 g，乙酸乙酯萃取物B 27.8 g，正丁醇得萃取物C 13.8 g。將A，B，C分別配制為100%和50%生藥濃度備用。

儀器：Powerlab多功能生理記錄儀（澳大利亞，ADInstrument；Model：ML 118；Name：Quad Bridge）；Chart 5分析軟件，SPSS分析軟件。

1.2 方法

大鼠正常飼養(yǎng)，禁食不禁水18 h，脫頸處死，迅速剖開腹腔找到胃，以幽門部與十二指腸交界處為起點剪下8～10 cm大鼠小腸，立即浸入臺氏液中，將其剪成1～2 cm小段，用眼科鑷和眼科剪輕輕除去腸內(nèi)容物，并除凈腸系膜。取活性較好的4段腸段，一端通過細(xì)線連接張力換能器，另一端固定于浴槽底部，用Powerlab多功能生理記錄儀描記離體平滑肌的收縮曲線，加藥0.1 mL，前后各觀察20 min，用Chart 5分析軟件記錄并分析大鼠小腸離體平滑肌的收縮幅值、頻率、最小值。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

給藥前后比較采用配對 t檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

結(jié)果見表1。可知，50%和100%生藥濃度的升麻水提液對大鼠離體小腸平滑肌具有抑制幅值和最小值的作用，但平均頻率增加，且差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05)。50%生藥濃度的升麻水提液氯仿萃取物對大鼠離體小腸平滑肌具有抑制幅值和最小值的作用，但頻率增加，且差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05)。100%生藥濃度的升麻水提液氯仿萃取物對大鼠離體小腸平滑肌具有抑制幅值、頻率、最小值的作用，且差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05)。加入升麻水提液正丁醇萃取物、乙酸乙酯萃取物后離體小腸平滑肌波形未見明顯變化，加藥前后的幅值、頻率、最小值比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

表1 各種藥液對離體小腸平滑肌的影響（±s，n=8）

表1 各種藥液對離體小腸平滑肌的影響（±s，n=8）

注：與給藥前比較，βP＜0.05。

藥液（含生藥濃度）升麻水提液（50%）升麻水提液（100%）氯仿萃取物（50%）氯仿萃取物（100%）正丁醇萃取物（100%）乙酸乙酯萃取物（100%）時間給藥前給藥后給藥前給藥后給藥前給藥后給藥前給藥后給藥前給藥后給藥前給藥后平均幅值（g）0.24±0.07 0.18±0.08β0.57±0.22 0.31±0.14β0.56±0.12 0.40±0.07β0.47±0.05 0.39±0.11β0.37±0.12 0.36±0.15 0.37±0.18 0.37±0.18平均頻率（Hz）0.34±0.01 0.42±0.02β0.24±0.06 0.39±0.08β0.31±0.02 0.39±0.03β0.37±0.04 0.29±0.07β0.25±0.03 0.29±0.05 0.34±0.04 0.32±0.04平均最小值（g）0.42±0.06 0.26±0.08β0.51±0.19 0.40±0.19β0.67±0.05 0.55±0.12β0.42±0.17 0.36±0.12β0.66±0.20 0.71±0.17 0.33±0.17 0.33±0.14

3 討論

近年來，學(xué)者們對升麻進行了大量研究。李從軍等[5]及Sakurai等[6]領(lǐng)導(dǎo)的研究小組對升麻的化學(xué)成分進行了系統(tǒng)研究，從升麻中提取分離了200余個化合物，主要含有三萜及其苷類、酚酸類及其衍生物、色元酮和揮發(fā)油等化合物。馬凌志等[7]采用水蒸汽蒸餾法提取升麻中的揮發(fā)油，并通過毛細(xì)管柱氣相色譜／質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)分析其成分，發(fā)現(xiàn)升麻揮發(fā)油中的主要成分為棕櫚酸，占所鑒定化合物的55.01%。劉蓓蓓等[8]研究發(fā)現(xiàn)，升麻對多種癌細(xì)胞如人肝癌細(xì)胞（HepG2）、人乳腺細(xì)胞（MCF-7，MDA-MB231）等均具有良好的抑制作用。劉方舟等[9]研究發(fā)現(xiàn)，升麻各提取物SMT75%醇提物(SMT1)、SMT總皂苷(SMT2)、SMT總有機酸(SMT3)體外均具有明顯抗乙型肝炎病毒(HBV)活性。

目前對升麻的研究主要集中于成分分析及抗癌作用方面，對升麻影響胃腸動力方面的臨床和藥理研究則很少。臨床采用加減升麻葛根湯治療嬰幼兒腹瀉，療效良好[10]。余勝珠等[11]觀察補中益氣湯聯(lián)合四神丸加減治療老年大腸癌術(shù)后腹瀉的臨床療效，與鹽酸洛哌丁胺膠囊及雙歧三聯(lián)活菌膠囊進行比較，治療組總有效率為88.89%，顯著高于對照組的50.00%（P＜0.05)。本課題組在對中醫(yī)名方“補中益氣湯”進行試驗研究的過程中，亦發(fā)現(xiàn)升麻是補中益氣湯止瀉作用的重要藥物之一，單味升麻亦具有較好的止瀉功效[12]。

本研究發(fā)現(xiàn)，升麻水提液對離體小腸平滑肌運動具有抑制作用，其氯仿萃取物對波形幅值和最小值的抑制作用與原水提液相似，且抑制作用穩(wěn)定，但對頻率的影響有興奮和抑制2種傾向，推測可能與劑量相關(guān)。升麻水提液乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物對離體小腸平滑肌的影響則并不明顯。由此可知，升麻對胃腸運動有一定的抑制作用，且該作用的有效部位存在于氯仿萃取部分。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部）[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：68.

[2]高雪枝.升麻升提作用的臨床應(yīng)用[J].陜西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報，1996，19(4)：10-11.

[3]賈海榮.枳實、升麻、柴胡伍用治胃下垂效果好[J].神經(jīng)藥理學(xué)報，1997(3)：94-95.

[4]文 魁，丁國華.中醫(yī)臨床必讀叢書-脾胃論[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2005：33.

[5]李從軍，陳迪華，肖培根.中藥升麻的化學(xué)成分(V)[J].中草藥，1995，26(6)：288-289，318.

[6]Sakurai N，Kozuka M，Tokuda H，et al.Antitumor agents 220.Antitumorpromoting effects of cimigenol and related compounds on Epstein-Barr virus activation and two-stage mouse skin carcinogensis[J].Biol Med Chem，2003，11(6)：1 137-1 140.

[7]馬凌志，何麗娟，高毓?jié)?中藥升麻的揮發(fā)油成分分析[J].首都醫(yī)藥，2007，14(2X)：41.

[8]劉蓓蓓，陳勝璜，陳四保.升麻化學(xué)成分及其抗腫瘤活性研究進展[J].中南藥學(xué)，2012，10(1)：53-58.

[9]劉方舟，時宇靜，郭姍姍，等.升麻提取物SMT體外抗乙肝病毒作用研究[J].世界中西醫(yī)結(jié)合雜志，2014，9(5)：534-536

[10]江英能.加減升麻葛根湯治療嬰幼兒秋季腹瀉39例[J].新中醫(yī)，1998，30(6)：14-16.

[11]余勝珠，楊光華，陳連生，等.補中益氣湯聯(lián)合四神丸加減治療老年大腸癌術(shù)后腹瀉18例[J].中國藥業(yè)，2013，22(8)：99-100.

[12]張建英，梁 玲，聶 堅，等.補中益氣湯水提物及萃取物對腸肌的作用[J].遼寧中醫(yī)雜志，2015，42（2）：411-412.

Influence of Extracts from Cimicifuga Foetida on the Motility of Ex Vitro Intestine in Rats

Zhang Jianying,Zuo Aixue,Liu Yichen
(Yunnan University of TCM,Kunming,China 650500)

s:Objective To investigate the effective part of intestinal motility in SD rats by Cimicifuga foetida extracts.Methods Based on the variation of amplitude,frequency and baseline of excised intestinal smooth muscle of rats,the effectiveness of the water extracts of C.foetida,and its chloroform extract,ethyl acetate extract,n-butanol its were compared.Results The water extracts of C.foetida restrained the amplitude,baseline significantly(P＜0.05),furthermore its chloroform extract had the same effect.Conclusion The water extracts of C.foetida restrained the movement of the isolated intestinal smooth muscle,and its effective part is chloroform fraction.

Cimicifuga foetida;Ex vitr intestine;intestinal motility

R285.5；R282.71

A

1006－4931(2015)23－0016－02

張建英（1980-），女，滿族，河北青龍人，碩士研究生，講師，主要從事中醫(yī)脾胃病臨床與試驗研究，（電子信箱）zhangjianyingyn＠126.com；左愛學(xué)（1978-），男，漢族，云南富源人，博士研究生，主要從事中藥化學(xué)及質(zhì)量控制研究工作，本文通訊作者，（電話）0871-65919635（電子信箱）zuoax＠163.com。

2015-02-05；

2015-09-03)

β國家自然科學(xué)基金項目，項目編號：81260514；云南省科技廳應(yīng)用基礎(chǔ)研究項目，項目編號：2011FZ160。